简述卵磷脂试验的方法

一、实验目的

  (1）了解卵磷脂酶试验的用途及原理。

  (2）学习卵磷脂酶试验的操作技术。

二、原理

  卵磷脂酶（Lecithinase）是一种能水解卵磷脂生成二酰甘油和磷酸胆碱的酶，常见于某些细菌（如产气荚膜梭菌、蜡样芽孢杆菌等）的致病机制中。卵磷脂酶试验用于检测细菌是否产生该酶，是微生物鉴定的重要指标之一。

  卵磷脂酶分解卵磷脂后，释放的不溶性二酰甘油在培养基中形成乳白色沉淀或浑浊环（即卵磷脂酶阳性反应）。常用含卵磷脂的培养基（如卵黄琼脂）进行检测。

三、实验材料

  (1）菌种：蜡样芽孢杆菌和产气荚膜酸菌。

  (2）培养基：卵黄琼脂培养基（海博产品货号：HB0262）。

  (3）其它：酒精棉球、酒精灯，无菌生理盐水（每支管装9mL),1mL无菌吸管，玻璃涂布棒，恒温箱等。

四、方法与步骤

  1、接种：在卵黄琼脂平板上划线或点种待测细菌。 

  2. 培养：35-37℃厌氧/需氧培养（依菌种需求）24-48小时。 

  3. 观察结果

五、实验结果

  平板上菌落周围形成乳白色混浊环者，为卵磷脂酶试验阳性，否则为阴性。

图一：卵磷脂阳性

图二：卵磷脂阴性

六、临床与鉴定意义

  产气荚膜梭菌：卵磷脂酶阳性是其重要特征，结合“双区溶血”现象（α-毒素作用）可辅助诊断气性坏疽。 

  蜡样芽孢杆菌：卵磷脂酶阳性与食物中毒相关。

  此试验广泛应用于临床病原菌鉴定、食品安全检测（如芽孢杆菌污染）及微生物学研究。

  注：参考文献：杜连祥，路福平，微生物学实验技术【M】北京：中国轻工业出版社，2008：163-164.

注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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