蛋白质的不同水解方式

  培养基中的各种胨类是常用的氮源来源，这些胨类，是由各种蛋白质通过不同方式水解得到的，蛋白质水解主要有三种方式：酸法水解、碱法水解和酶法水解。以下是它们的优缺点总结：

1. ‌酸法水解‌

  优点‌：①能完全水解蛋白质，生成游离氨基酸混合物。②不会引起氨基酸消旋化（产物均为L型氨基酸）。

  缺点‌：①会破坏丝氨酸、色氨酸和苏氨酸等氨基酸‌。②可能产生有毒副产物（如氯丙醇）和腐黑质‌。③需高温高压条件（如10%盐酸，100-120℃回流16-20小时）‌。

2. ‌碱法水解‌

  优点‌：①可完全水解蛋白质，且色氨酸相对稳定。

  缺点‌：①会导致氨基酸消旋化（生成D型和L型混合产物）。②破坏丝氨酸、赖氨酸等氨基酸‌。③需强碱条件（如6M氢氧化钠煮沸6小时）‌。

3. ‌酶法水解‌

  优点‌：①条件温和（常温中性pH，36-60℃），不破坏氨基酸结构。②无消旋化，产物为L型氨基酸‌。③环境友好，无有毒副产物‌。

  缺点‌：①水解不彻底（因酶专一性，残留多肽片段）。②需多种酶组合以提高水解效率‌。

  在微生物培养原料选取时，往往选择使用酶法水解的胨类，虽然酶法水解往往得到的不是彻底的氨基酸产物，但是作为微生物利用的氮源已经足够，且不会因为缺乏氨基酸而导致微生物无法生长。但部分实验中，也可以根据实验目的选取酸水解的蛋白，如想筛选掉乳酸菌时，可以使用酸水解酪蛋白，不影响如金黄色葡萄球菌或肠杆菌科微生物生长，而乳酸菌类则由于酸水解酪蛋白缺少部分必须营养成分而几乎不生长或生长极差。但做靛基质试验时，不能够选取酸水解酪蛋白，因为其色氨酸均被破坏，无法做出正确的实验结果。

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