微生物培养过程中，如何判断杂菌污染

  我们在微生物培养时，经常遇到菌落形态不一的现象，如何判断是自己接种的菌，还是过程污染导致长出来不同的杂菌。判断杂菌污染的方法有多种，以下是一些常用的判断方法：

一、观察培养物的生长情况

  1‌、观察培养基颜色变化‌：若培养基颜色发生异常变化，如由红色变为黄色或产生浑浊，可能是杂菌污染的表现。

  2‌、检查菌落形态‌：在平板培养或斜面培养上，若发现有异常菌落出现，如菌落形态、颜色、大小与生产菌不同，可能是杂菌污染。

二、显微镜检查法

 ‌ 1、革兰氏染色‌：对样品进行涂片、染色，然后在显微镜下观察微生物的形态特征。若发现有与生产菌形态特征不一样的其他微生物存在，即可判断为杂菌污染。

 ‌ 2、芽孢染色或鞭毛染色‌：在染菌初期，杂菌数量较少，形态特征不明显时，可进行芽孢染色或鞭毛染色，以更准确地识别杂菌。

三、生化指标检测

‌  1、检测耗氧量‌：

  当杂菌污染时，如果污染的是好气性杂菌，会使溶解氧在较短的时间内下降，甚至接近零，且长时间不能回升。

  如果污染的是非好气菌，生产菌的代谢由于受污染而遭抑制时，会使耗氧量减少，发酵液中的溶解氧会升高。

  2‌、检测pH值变化‌：

  某些杂菌的代谢活动会改变培养基的pH值，因此可以通过检测pH值的变化来判断是否发生杂菌污染。

四、其他检测方法

 ‌ 1、噬菌体检查‌：若怀疑发酵液被噬菌体污染，可采用双层平板法、单层平板法、平板交叉划线法或快速检测法进行检查。若连续三次样品的检查中都发现噬菌斑，即可判断为感染噬菌体。

 ‌ 2、无菌试验‌：无菌试验是判断染菌的主要依据之一，可以通过培养液的显微镜检查、培养液的生化指标变化情况等方法来判断培养液是否污染杂菌。

五、注意事项

 ‌ 1、定期检查‌：在培养过程中，应定期检查培养物的生长情况，以及时发现杂菌污染。

 ‌ 2、无菌操作‌：在进行接种、培养等操作时，应严格遵守无菌操作规范，避免杂菌污染。

  3‌、设备清洁与维护‌：定期清洁和维护培养设备，避免设备成为杂菌污染的源头。

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