克罗诺杆菌的活化、保存和鉴定

一、克罗诺杆菌简介

  克罗诺杆菌（Cronobacter）原名阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii），最初被发现时被认为是一种产黄色素的阴沟肠杆菌，后经过药敏试验、生化试验对比，与阴沟肠杆菌有所不同，被命名为阪崎肠杆菌，归属于肠杆菌属（Enterobacter）。又经现代分子生物学鉴定等技术确认分析，成立了独立的克罗诺杆菌属，归属于肠杆菌科，包括阪崎克罗诺杆菌 (Cronobacter sakazakii)、丙二酸盐克罗诺杆菌(C.malonaticus)、苏黎世克罗诺杆菌 (C.turicensis)、莫金斯克罗诺杆菌 (C.muytjensii)、康帝蒙提克罗诺杆菌 (C.condimenti)、尤尼沃斯克罗诺杆菌(C.universalis) 和都柏林克罗诺杆菌(C.dublinensis)七个种。其中，都柏林克罗诺杆菌包括3个亚种，分别是都柏林克罗诺杆菌都柏林亚种(C. dublinensis subsp.dublinensis)，都柏林克罗诺杆菌奶粉亚种 (C.dublinensis subsp.lactaridi) 和都柏林克罗诺杆菌洛桑亚种 (C.dublinensis subsp.lausannensis)。克罗诺杆菌是肠道内寄生的一种有周生鞭毛，有动力，兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，对成人危害较小，但对婴幼儿致病性很强，且致死率较高，在许多食品分布广泛，但由于其对婴幼儿的杀伤力较大，因此婴幼儿的乳制品及其他食品中的克罗诺杆菌检测尤为重要。

二、阪崎克罗诺杆菌的培养

  克罗诺杆菌的营养需求不高，使用营养琼脂、营养肉汤、TSB、TSA、BHI等培养基均可培养，生长温度较为宽泛，在36℃培养即可快速生长，具有一定的耐热性，在44.5℃也能快速生长繁殖。大部分克罗诺杆菌能产生黄色色素，观察黄色色素时通常需在25℃培养48h左右，可观察到菌落呈明显的亮黄色。

三、阪崎克罗诺杆菌的保存

  阪崎克罗诺杆菌生命力较强，不容易死亡，使用营养琼脂或TSA的斜面在2-8℃保存也可存活数月，长期保存可使用瓷珠保存法/甘油冷冻保存法/脱脂牛奶冷冻保存法等方法进行低温冷冻保存，在-20℃至少也可存活数年，在-70℃以下或液氮中保存可存活数十年。

四、克罗诺杆菌的杀灭和预防

  由于克罗诺杆菌对婴幼儿的危害很大，因此在调制婴幼儿食品时需格外注意。克罗诺杆菌本身无芽孢结构，超过65℃即可快速死亡，因此在冲泡奶粉时需使用至少80℃以上的温开水经过数分钟充分浸泡，其他食品经过一定程度的热处理即可杀死克罗诺杆菌，避免食用久置的食品。目前国家和大品牌的乳品企业对乳制品中的克罗诺杆菌监管和检测相当严格，尽量应购买正规厂商的产品，拒绝三无产品。

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