一、用途:
用于洋葱伯克霍尔氏菌的分离培养。
二、检验原理:
酪蛋白胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子;乳糖和蔗糖为可发酵的糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;酚红为酸碱指示剂;结晶紫可抑制革兰氏阳性菌的生长;琼脂为培养基的凝固剂。庆大霉素为广谱抗生素,对多数假单胞菌属、变形杆菌属、大肠菌群、葡萄球菌属、需氧芽孢杆菌属等多种革兰氏阴阳性菌有较强的抗菌活性;万古霉素可抑制细菌细胞壁的合成,对金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌等作用强,对艰难梭菌、炭疽杆菌、白喉杆菌等作用也良好;多粘菌素B对绿脓杆菌、大肠杆菌、克雷伯氏菌及嗜血杆菌等多种革兰氏阴性菌有抑制作用。
三、培养基配方(g/L):
酪蛋白胨 |
10.0 |
乳糖 |
10.0 |
蔗糖 |
10.0 |
氯化钠 |
5.0 |
酵母浸粉 |
1.5 |
酚红 |
0.08 |
结晶紫 |
0.002 |
琼脂 |
1.4 |
PH 6.8±0.3 25℃ |
四、检验方法:
称取本品50.58g,加热煮沸完全溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟。冷却至45℃-50℃时,每200ml培养基中加入1支HB9130a Gentamicin添加剂(2mg)、1支HB9130b Vancomycin添加剂(0.5mg)和1支HB9130c Polymyxin B添加剂(120000U),混匀,倾入无菌平皿,备用。
五、质控结果:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置30℃需氧培养24-72小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
洋葱伯克霍尔德氏菌 |
ATCC25416 |
10-100 |
定量 |
PR≥0.5 |
无色菌落,周围培养基变红 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
定性 |
/ |
抑制 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
定性 |
/ |
抑制 |
铜绿假单胞菌 |
ATCC9027 |
/ |
定性 |
/ |
抑制 |
洋葱伯克霍尔德菌 |
ATCC BAA-245 |
10-100 |
定量 |
PR≥0.5 |
无色菌落,周围培养基变红 |
多噬伯克霍尔德氏菌 |
ATCC BAA-247 |
10-100 |
定量 |
PR≥0.5 |
无色菌落,周围培养基变红 |
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