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一、实验原理
用途：用于李斯特氏菌的选择性增菌培养。
原理：胰胨、多价胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钾是缓冲剂；葡萄糖提供碳源；盐酸吖啶黄素和萘啶酮酸为抑菌剂，盐酸吖啶黄素对多种革兰氏阳性菌有较强的抑制作用，萘啶酮酸可抑制多数革兰氏阴性菌的生长，对李斯特氏菌抑制作用较弱。
二、培养基配方（g/L）
|
胰胨 |
17.0 |
|
多价胨 |
3.0 |
|
酵母浸粉 |
6.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
磷酸氢二钾 |
2.5 |
|
葡萄糖 |
2.5 |
|
盐酸吖啶黄素 |
0.015 |
|
萘啶酮酸 |
0.04 |
|
pH值7.3±0.2（25℃） |
|
三、试验方法
1. 称取本品36.1g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，分装试管，121℃高压灭菌15分钟，冷却，备用。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基（李斯特氏菌增菌肉汤（LEB））以及参比培养基（胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）HB0177）。
3. 放置于30℃±1℃需氧培养48小时，观察试验结果。
四、结果观察
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置于30℃±1℃需氧培养48小时。培养结果如图1。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
生长情况 |
其它特征 |
|
单增李斯特氏菌 |
ATCC 19114 |
10-100 |
+++ |
浑浊 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
- |
抑制 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
-/+ |
抑制或部分抑制 |
TSA接种量计数结果：
李斯特氏菌增菌肉汤（LEB）培养基：
图1 质控菌株在李斯特氏菌增菌肉汤（LEB）培养基中的生长情况
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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