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一、 使用前准备
1. 选择合适的移液枪和吸头:
· 量程匹配: 确保移液枪的量程覆盖您需要的体积。最佳实践是在移液枪量程的35%-100%范围内使用,以获得最高精度。避免使用其最小量程(如1-2μL)进行常规操作。
· 吸头匹配: 使用制造商推荐或与移液枪型号匹配的高质量吸头。不匹配的吸头会导致密封不严、漏液或体积不准。
· 特殊液体: 对于高黏度、高挥发性或腐蚀性液体,应选择专门的移液枪和吸头(如带滤芯的吸头以防污染和腐蚀)。
2. 体积设定:
· 从大体积调节至小体积时,可直接顺时针旋转至刻度。
· 从小体积调节至大体积时,应先逆时针调至超过目标体积,再顺时针回调至目标刻度,以消除机械背隙(回程误差),确保精度。
· 严禁将体积调节旋钮转到量程范围之外,这会损坏移液枪。
3. 预润洗(前吹打):
· 对于高精度实验,在吸取同一种试剂时,应先吸取一次液体并排回原容器。这样可以湿润吸头内部,减少因液体吸附在吸头壁上造成的体积误差。对于常规实验,此步骤可酌情省略。
二、 操作过程(关键步骤)
遵循“平稳、缓慢、一致”的原则。
1.安装吸头:
将移液枪垂直插入吸头,用力均匀、适度地向下按压,然后轻轻左右转动半圈以确保密封。用力过猛会导致移液枪尖端磨损,甚至卡死;用力不足则会导致漏气。
2.吸取液体:
· 姿势: 保持移液枪 垂直,吸头尖端浸入液面以下2-3毫米。浸入过深会增加吸头外壁的液膜残留,导致体积偏大;浸入过浅则容易吸入空气。
· 动作: 缓慢、平稳地松开拇指,让推杆匀速回升。切勿突然松手,否则会产生气泡或气溶胶,导致体积不准和污染。
· 停留: 对于高黏度液体,在吸液后应在液面下停留1-2秒,让液体充分充满吸头。
3.移出观察:
· 将移液枪平稳移出液面,必要时可用吸头外壁轻轻触碰容器口,以擦掉挂在外部的液滴。检查吸头内是否有气泡或液体是否不完整。如有,应弃去吸头重新吸取。
4. 排放液体:
· 将移液枪以 一定角度(约10-45°) 贴靠在目标容器的内壁上。
· 第一步: 平稳地将拇指按压到第一停点(First Stop),排出液体。
· 第二步: 停留约1秒钟,然后将拇指继续按压至第二停点,以排出吸头尖端的残留液体。对于黏性液体,此步骤尤为重要。
· 第三步: 在按住第二停点的状态下,将移液枪吸头沿着容器内壁向上滑出。
5. 松开按钮:
· 最后,缓慢松开拇指,让推杆复位。如果直接弹回,可能会吸入目标容器中的液体或气溶胶,造成污染或交叉污染。
三、 使用后维护
1. 卸下吸头:
· 使用移液枪上的退吸头杆来卸除吸头,切勿用手直接拔下,以免损坏移液器末端。
· 将使用过的吸头弃入合适的废液缸或生物危害垃圾袋中。
2. 归位:
使用完毕后,将移液枪的体积调至其 最大量程,然后竖直放置在移液枪架上。这有助于保持内部弹簧的弹性,延长使用寿命。
四、日常校准与保养
1. 定期校准: 移液枪属于精密仪器,应定期(通常每6-12个月)进行校准。对于高频率使用或用于关键实验的移液枪,应增加校准频率。校准通常包括重量分析法(测水的重量)和染料分光光度法。
2. 保持清洁: 如果发生液体倒吸污染,应立即拆卸并清洁移液枪的下半部分。请按照说明书进行操作。
3. 正确消毒: 如需在超净工作台内使用,可用75%乙醇擦拭移液枪外部。切勿将整支移液枪浸泡在消毒液中。
4. 专人专用/专用: 如果可能,固定移液枪用于特定实验或特定试剂,以减少交叉污染的风险。
五、常见错误与禁忌
· 错误: 吸取不同样品时不更换吸头。
· 错误: 移液枪平放或倒置(尤其当吸头内有液体时),会导致液体倒流腐蚀内部活塞。
· 错误: 快速弹射按钮。
· 错误: 不按量程范围使用,强行过度旋转旋钮。
· 禁忌: 吸取强挥发性、强腐蚀性液体(如浓酸、浓碱、氯仿等)未使用带滤芯的吸头或专用移液器。
· 禁忌: 用移液枪直接混匀液体(应使用涡旋振荡器)。
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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