培养基中的添加剂如何过滤除菌

  培养基添加剂的过滤除菌主要采用‌滤膜过滤法‌，尤其适用于那些不能耐受高温高压灭菌的热敏性成分（如某些激素、抗生素）‌。其核心原理是利用特定孔径的滤膜物理截留微生物，实现除菌目的‌。

一、过滤除菌的原理

  0.22 μm滤膜能有效去除细菌和真菌，因为大多数细菌的尺寸在0.2-2μm之间，真菌细胞也往往大于0.22μm‌。当含有微生物的液体通过滤膜时，这些较大的微生物会被截留在滤膜表面，从而达到除菌效果‌。不过，病毒（直径通常小于0.22μm）和部分芽孢杆菌的芽孢（直径可能接近或略小于0.22μm）则可能穿透滤膜，需要结合其他方法（如更小孔径滤膜或化学灭活）来彻底清除‌。

二、操作步骤详解

  1、‌准备工具‌：选择合适规格的注射器（如1 mL、10 mL或20 mL）和0.22μm的除菌滤膜及滤膜装置器‌。

  2、‌吸取液体‌：将需要过滤的培养基添加剂用注射器吸入针管中‌。

  3、‌安装滤膜‌：拔掉针头，将注射器前端与滤膜装置紧密连接‌。

  4、‌过滤液体‌：将液体缓慢推入一个无菌的接收容器（如离心管或者无菌试管）‌。如果液体量过少，可先吸入少量空气，再推出液体，以确保液体完全通过滤膜。

三、注意事项与影响因素

  1、‌滤膜选择‌：0.22μm滤膜是除菌过滤的常用选择，但需注意其对病毒和芽孢的去除效果有限‌。

  2、‌液体性质‌：培养基的组成（如含黄豆粉、淀粉等）和发酵终了时间（菌丝是否自溶）都会影响过滤速率‌。

  3、‌操作规范‌：整个操作过程需在无菌环境下进行，避免二次污染。‌

四、总结

  过滤除菌是一种温和有效的物理方法，特别适合处理热不稳定的培养基添加剂。操作时需严格遵循无菌规范，并根据具体需求选择合适的滤膜和辅助方法。‌

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