10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的原理及使用方法

一、实验原理

  用途：用于金黄色葡萄球菌增菌培养，也可用于生产线的无菌模拟灌装。

  原理：胰蛋白胨、大豆蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子；较高含量的氯化钠提供较高的渗透压，抑制大多数非葡萄球菌的微生物；磷酸氢二钾是缓冲剂；丙酮酸钠促进细菌生长；葡萄糖提供碳源。

二、培养基配方（g/L）

三、试验方法

  1. 称取本品135.0g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，分装试管，121℃高压灭菌15分钟（或按相关工艺进行过滤除菌），备用。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基（10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤）以及参比培养基（胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）HB0177）。

  3. 放置于36℃±1℃需氧培养18-24小时，观察试验结果。

  4. 吸取10μL经培养后的目标菌培养液，均匀涂布或螺旋涂布接种到Baird-Parker琼脂平板上，每支试管划1个平板，放置于36℃±1℃需氧培养24-48小时。

  5. 吸取10μL经培养后的非目标菌培养液，均匀涂布或螺旋涂布接种到胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）平板上，每支试管接种1个平板，放置于36℃±1℃需氧培养18-24小时，观察试验结果。

四、结果观察

  按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置于36℃±1℃需氧培养18-24小时。培养结果如图2。

  TSA接种量计数结果（大肠埃希氏菌TSA接种量比试管接种小10倍稀释度）：

图1 质控菌株在TSA平板中的接种量

  10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基：

图2 质控菌株在10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基中的生长情况

  Baird-Parker平板和TSA平板的质控结果：

图3 金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板和大肠杆菌在TSA平板中的质控结果

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