Rustigian氏尿毒酶试验培养基（改良）检验原理和使用方法

一、用途及检验原理：

  该培养基用于细菌的脲酶检测。

  酵母浸粉在培养基中作为基础营养物质提供菌体生长所需的氮源、碳源等；磷酸盐是缓冲剂，能中和部分细菌代谢产生的碱；酚红作为酸碱指示剂；某些细菌能产生尿素酶水解尿素，产生碱性物质碳酸铵，从而使得培养基中的指示剂酚红由橘黄色变为红色。

  附加试剂：HB4096 40%尿素水。

二、培养基配方（g/L）：

  略

三、试验方法：

  1. 称取本品0.3g，加热溶解于950mL纯化水中，分装三角瓶中，121℃高压灭菌15分钟，待冷却至50℃后，每95mL基础中无菌操作加入一支40%尿素水5mL，混匀后分装至无菌试管中，备用。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和参比培养基（HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂（TSA））；

  3. 放置于恒温培养箱36℃±1℃需氧培养24h±2h，观察试验结果。

四、试验结果判断：

  接种以下质控菌株，放置36℃±1℃需氧培养24h±2h，试验结果如图1所示。

  质控菌株在TSA上接种量倾注计数结果

图1 质控菌株在Rustigian氏尿毒酶试验培养基（改良）上的生长情况

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