肺炎支原体分离用的双相培养基

【成分和制法】

  1.底层琼脂斜面：其成分与上述支原体琼脂相同，不加两性霉素B。以无菌手续，分装于无菌链霉素空瓶中，每瓶3～5ml，置成斜面，此为底层。

  2.液体培养基：其成分与上述支原体传代用液体培养基相同。但在未高压灭菌前，再加入葡萄糖1g，美蓝0.001g(即1%美蓝溶液0.1ml),0.1%酚红水溶液2ml，115℃灭菌15分钟，冷却后，再加入辅助成分和防止杂菌生长的成分。然后，在上述底层琼脂斜面上，每瓶再加入液体培养基3～5ml，瓶塞用煮沸灭菌的后口橡皮塞。经37℃培养过夜，无菌试验阴性者,存放4℃冰箱中备用,可保存1个月。

【用途】

  作喉拭标本直接分离肺炎支原体用。

【注意事项】

  已接种的双相培养管，培养37℃普通环境2~4周，观察结果，阳性生长见双相管由淡紫色变成绿色，再转变为黄色，因肺炎支原体发酵葡萄糖，还原美蓝。取阳性管用分离支原体固体平皿分离菌落，平皿放入95%N2和5%CO2环境中，或放入5%CO2环境中培养2~4周。阳性平皿可见菌落生长。

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