孟加拉红在细菌培养中的作用

  孟加拉红（又称虎红、玫瑰红）在微生物培养中主要用作一种选择性抑菌剂和弱酸性指示剂，其核心作用是抑制细菌和放线菌的生长，从而选择性促进真菌（特别是酵母和霉菌）的增殖，在真菌检测和计数中具有不可替代的价值。

  孟加拉红是一种人工合成的三苯甲烷类染料（化学名称：四氯四碘荧光素二钠盐），它在微生物学中的应用主要基于其独特的抑菌机制和在特定条件下的显色特性。

一、核心作用机制

1.选择性抑制细菌和放线菌

  主要机制：孟加拉红能干扰革兰氏阳性细菌的氧化磷酸化过程，抑制其能量代谢（ATP合成），从而有效抑制其生长。它对大多数革兰氏阴性细菌也有一定的抑制作用。

  选择性来源：相比之下，大多数真菌（酵母和霉菌） 对孟加拉红的耐受性更强，能在其存在的培养基上正常生长。这使得孟加拉红培养基成为分离真菌的理想选择。

2.弱酸性指示作用

  孟加拉红在酸性环境下（pH约4.5以下） 会从红色变为粉红色或无色。

  在真菌培养中，许多酵母和霉菌在生长代谢过程中会产生酸性物质（如有机酸），导致其菌落周围的培养基pH下降。因此，在含有孟加拉红的培养基上，产酸的真菌菌落周围有时会出现褪色的晕圈，这可以作为初步的鉴别特征之一。

3.弱化霉菌菌丝蔓延

  低浓度的孟加拉红能轻微抑制霉菌菌丝的过度蔓延生长，促使霉菌形成更紧密、更典型的菌落，便于进行菌落计数和形态观察，防止不同菌落因过度生长而相互覆盖、干扰计数。

二、经典应用：孟加拉红琼脂培养基

  基础营养:含蛋白胨、葡萄糖，提供真菌生长所需的基本碳、氮源。

  选择性成分: 孟加拉红：核心抑菌剂，抑制细菌和放线菌。

  氯霉素或链霉素：常与孟加拉红联用，通过不同机制（抑制细菌蛋白质合成）进一步增强抗菌谱，尤其是针对革兰氏阴性菌。

  pH值:通常调节至5.6±0.2，营造适合真菌生长、同时进一步抑制大多数细菌的酸性环境。

  主要用途:食品、药品、化妆品中的霉菌和酵母菌总数测定。环境样本（如空气、土壤）中真菌的分离与计数。临床标本中某些真菌的初步分离。

  在孟加拉红琼脂平板上，典型的培养结果如下：

  真菌菌落：呈现其自然颜色（如霉菌的绿、黑、黄等，酵母的乳白色、红色等），有时菌落周围培养基因产酸而褪色。

  细菌菌落：通常被完全抑制或仅有极微小的菌落，无法正常生长。

三、与其他真菌选择性培养基的对比

  孟加拉红琼脂|孟加拉红+抗生素（双重抑菌）:应用最广的标准方法，抑菌谱广，适用于大多数样品。能显示产酸特性。

  沙氏葡萄糖琼脂|低pH（~5.6）:营养丰富，是真菌培养的“基础培养基”。其选择性主要依赖酸性环境，对耐酸细菌抑制不完全，常需添加抗生素。

  马铃薯葡萄糖琼脂|低pH :营养成分更天然，常用于促进真菌产孢和形态观察，选择性也依赖低pH和抗生素添加。

  氯硝胺-孟加拉红琼脂|氯硝胺+孟加拉红:特异性抑制土壤真菌（如毛霉、根霉等）的蔓延生长，特别适用于土壤或食品中非蔓延性真菌的计数。

四、使用注意事项与局限性

  1.光敏性：孟加拉红对光敏感，配制好的培养基应避免光保存，平板在培养时也建议避光或置于暗处，以防染料降解失效。

  2.非完全特异性：虽然能抑制绝大多数细菌，但极少数耐酸或耐药的细菌（如某些乳酸菌、醋酸菌）仍可能生长，需要经验进行区分。

  3.对部分真菌的抑制：高浓度的孟加拉红可能抑制某些对染料敏感的真菌（如部分酵母）。因此，其浓度需严格控制（通常为25-50 mg/L）。

  4.无法区分致病与非致病真菌：它仅提供选择性分离，进一步的菌种鉴定需要借助形态学观察、分子生物学等方法。

总结

  孟加拉红凭借其选择性抑制细菌、弱化霉菌蔓延的特性，结合其作为弱酸性指示剂的辅助功能，成为真菌学检测中一种经济、有效且经典的选择性试剂。以它为核心的孟加拉红琼脂培养基，是食品安全、环境监测和工业微生物学等领域进行霉菌和酵母菌计数与分离的“金标准”方法之一。

注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

上一篇：几种常见细菌培养基显色剂的作用与应用

下一篇：没有了！