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一、前期准备
1.器材选择
拭子材质:优先聚酯纤维或尼龙植绒拭子(避免棉质干扰检测),病毒采样需非木质柄部且带3cm预折痕。
中和剂:含消毒剂表面需使用含0.1%硫代硫酸钠或甘氨酸的洗脱液。
规格板:5cm×5cm灭菌不锈钢板(面积<100cm²物体全表面采样)。
2.人员防护
常规环境:外科口罩+隔离衣+单层乳胶手套。
高风险环境(传染病病房/冷链阳性区):医用防护服+N95口罩+护目镜+双层手套。
3.采样规划
绘制采样地图,标注高频接触点(门把手、设备按钮等每日接触>200次区域)。
冷链食品采样需同步记录表面温度及环境湿度。
二、标准化采样流程
1.表面预处理
消毒后采样:常规监测需在清洁消毒1小时后进行。
消毒前采样:感染暴发调查时直接采样以捕获病原体。
2.规格板操作
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步骤 |
要点 |
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放置 |
酒精灯火焰消毒规格板边缘,由清洁区向污染区推进 |
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涂抹手法 |
拭子45°角按压(3-4N力),"井"字往返5次/15cm² |
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时间控制 |
单点操作≤20秒,避免表面干燥 |
3.特殊表面处理
不规则表面(门把手/器械凹槽):直接涂抹法,旋转拭头深入缝隙。
液体残留:用无菌吸附棉片覆盖10秒后移入采样管。
冷冻表面:采样前−20℃预冷拭子防止结霜。
三、样本处理与质控
1.样本保存
细菌培养:拭子浸入10ml含中和剂洗脱液,振荡30秒。
病毒检测:折断拭子头入病毒保存管,液面浸没>80%。
2.运输规范
细菌样本:4℃冷藏送检,≤4小时抵达实验室。
病毒样本:2-8℃冷链运输,箱内预置温度记录仪。
3.质控措施
每批次采1份空白对照(开盖暴露空气后密封)。
平行采样:每10㎡采集3个点位进行数据交叉验证。
四、结果判定与场景应用
1.医疗环境标准
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区域 |
合格标准 |
采样频率 |
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洁净手术室 |
≤5 CFU/cm² |
每月1次 |
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普通病房 |
≤10 CFU/cm² |
每季度1次 |
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ICU |
≤5 CFU/cm² |
每周1次 |
2.食品与应急场景
食品车间:采样需覆盖传送带缝隙、刀具凹槽等卫生死角。
疫情暴发区:采用"Z"字形路径采集,避免遗漏污染点。
关键注意:
检出阳性样本时,需用同批次未开封拭子复测排除假阳性,并追溯采样人员手部菌群。
技术依据:
本指南综合WS/T 797-2022《医疗机构环境表面清洁消毒质量监测》、GB 4789.1-2024《食品微生物学检验总则》及冷链新冠病毒采样规范制定,适用于医疗感染控制、食品安全监测及公共卫生应急响应场景。
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