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一、培养基的使用背景
在进行特定菌株的分离或检测时,由于经常存在其他各种杂菌的干扰,或者杂菌数量占据绝对优势,而需要分离的目标菌含量较少的情况下,直接分离到想要的目标菌株是比较困难的,特别是丰度比较低的时候,几乎不可能直接分离到。因此,先进行一定程度的培养,使目标菌进行一定量的扩增,则更容易分离检测到想要的目标菌。然而在目标菌不占优势的情况下,为了尽可能保证目标菌的快速繁殖,减少杂菌的繁殖速度,这种针对性的使某类特定菌株能够繁殖的增菌液体培养基,即为选择性增菌液体培养基。
二、培养基的组成
选择性增菌液体培养基通常是由一些基础营养成分(或非选择性增菌培养基)补加一定的抑菌成分,或者通过高盐、高渗、调整特定pH等条件使培养基具有选择性。例如李斯特氏菌选择性增菌常用的Fraser培养基,内含有蛋白胨、酵母浸粉等基础营养促使李斯特氏菌能快速生长,而氯化锂、吖啶黄素、萘啶酮酸等成分则能广泛抑制一些杂菌的生长。此外,通过特定的温度或培养条件也可以达到特定的选择效果,例如沙门氏菌的选择性增菌使用的TTB培养基,在杂菌含量不多的情况下36℃培养即可,但在杂菌含量较多的情况下采用42℃培养,既能保证沙门氏菌的快速生长,高温又能减少不耐热细菌的生长。
三、培养基特性
选择性增菌培养基的“选择性”也是有强弱之分的,“针对性”也会有所不同,且许多选择性增菌培养基对目标菌也会有一定的抑制效果。例如金黄色葡萄球菌选择性增菌培养基7.5%氯化钠肉汤和改良Giolitti and Cantoni肉汤,前者是利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性,通过高浓度的氯化钠抑制不耐盐细菌的生长,但其他具有耐盐特性的细菌(如一些芽孢杆菌)和同属的一些其他葡萄球菌也能正常生长,后者则是通过氯化锂与高浓度的亚碲酸钾抑制杂菌的生长,同属葡萄球菌的一些其他的葡萄球菌耐受性不如金黄色葡萄球菌也会受到抑制,此培养基的抑制性虽然对杂菌的抑制性非常强,但是对金黄色葡萄球菌也有较强的抑制效果,在样品中金黄色葡萄球菌含量较少的情况下,适合选用7.5%氯化钠肉汤;若样品中金黄色葡萄球菌含量较多,可以使用改良Giolitti and Cantoni肉汤。
四、选择性增菌培养基的设计和改进
某些情况下,现有的选择性增菌培养基有时候并不能很好的满足实验要求,我们也可以根据实际情况对培养基做出调整和改进。例如MRS肉汤常用于培养乳酸菌,若要对含有乳酸菌、双歧杆菌样品中的双歧杆菌进行选择性增菌培养,则可以在MRS肉汤中加入莫匹罗星锂盐抑制乳酸菌的生长。若要对样品中的酵母菌进行选择性增菌培养,可以以沙氏葡萄糖液体培养基(或改良马丁培养基、马铃薯葡萄糖肉汤等真菌常用培养基)为基础,加入氯霉素、链霉素或土霉素等抗生素,抑制细菌的生长,达到对酵母菌更好的选择性增菌培养效果。
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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