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【原理】
基本同柯少夫培养基,但此培养基中又加有血红蛋白,营养更好。
【成分】
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蛋白胨 |
1g |
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Ringer液 |
200ml |
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SÖrensen液 |
100ml |
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1N 磷酸 |
2ml |
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无菌兔血清 |
0.3ml |
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血红蛋白 |
少许 |
【制法】
(1)取蛋白胨1g溶于100mL蒸馏水中,加热煮沸;
(2)加入RINGER液200ML,再予煮沸(RINGER液:NaCl8. 5g、KCl0. 2g、CaCl20.2g、 Na2CO30.01g,蒸馏水加至100ml);
(3)加入SÖrensen液(pH7.2)(SÖrensen)100ml,加热煮沸;液:KH2PO4(9.078g/1000ml)28mL、Na2HPO4(12.28g/1000ml)72ml。
(4)加入1N磷酸2ml;
(5)将此混合物煮沸5分钟,加入磷酸后,产生沉淀,待过滤后,即可获得较清明溶液;
(6)冷却,以滤纸过滤,100℃加热30分钟;
(7)分装于小的灭菌瓶中或试管中,每管3ml;
(8)将含培养基的瓶子或试管100℃加热30分钟;
(9)每瓶或每管加入兔血清0.3ml及少量的血红蛋白;
(10)56℃水浴中灭活30分钟;
(11)将瓶或管置于37℃孵箱中过夜,行无菌试验后,备用。
【用途】
用于钩端螺旋体增殖培养。
【注意事项】
所用兔血清包括抽血及分离血清,严格无菌操作,以免污染培养基。每批培养基一定进行无菌试验培养后才可用。
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