敏感动物培养基

【原理】

  小白鼠对衣原体敏感性强，衣原体感染材料接种小白鼠腹腔后，容易分离到衣原体。

【成分】

  小白鼠若干只。

【制法】

  同敏感动物-天然培养基之二。

【用途】

  分离培养鹦鹉热和沙眼等衣原体。将鹦鹉、火鸡和鸭的衣原体感染材料(或患者的感染材料)配制成10%~20%的无菌悬液取0.5ml接种小白鼠腹腔。每份标本至少接种4~6只小白鼠，观察至30天。其间死亡的小白鼠，取肝、脾等脏器涂片染色镜检有无衣原体。2~3天死亡的小白鼠，往往看不到异常病变，肝脾正常，但镜检内皮细胞可见到大量的衣原体颗粒。

  在第5～15天内死亡的小白鼠，脾脏肿大，肝脏亦可见有早期坏死。镜检可见肝脏内出血和坏死，肝、脾中的吞噬细胞内充满衣原体。小白鼠活至21天不死，则剖杀，将其肝、脾制成悬液进行盲目传代。如盲传3代仍为阴性，则不再传。21天不死的小白鼠，解剖时病变显著者不多，往往只能见到肠管轻度肿胀，略呈灰白色，腹腔内也可能出现少量腹水。有的脾脏肿大，肝脏变脆并出现斑点，肾脏变灰。组织涂片中衣原体分布稀疏。但衣原体可长期（长达300天）存在于症状不明显的小白鼠体内，此种小白鼠多具有抗传染免疫。

【注意事项】

  1.腹腔接种法适用于大批材料的接种，简单易行。为了提高分离率，同一份感染材料可多次给同一只小白鼠腹腔内接种（隔一天一次)，尽管感染材料处理不完善，污染有细菌，但采用此法，经腹膜生物除菌作用，仍可获良好结果。

  2.脑内接种：此法是分离鹦鹉热衣原体最敏感的快速方法（对分离性病淋巴肉芽肿衣原体稍差)，脑内接种不侵犯呼吸道，所以也就不会激活潜在性小鼠肺炎。接种量小，易取材，但此法对细菌很敏感，因此所采集标本应绝对严格无菌要求。适用于此法接种的标本有：人体组织标本，禽类的心包囊或气囊中无菌性渗出液，感染小白鼠的组织或腹水。组织可制成10%悬液，脑内接种量为0.03ml。小白鼠通常在接种后24~48小时即出现嗜眠和瘫痪，3~5日内死亡，硬脑膜涂片充满衣原体，是很好的快速诊断方法。

  3.鼻腔内点滴：主要用于鹦鹉热衣原体。接种时先用乙醚作轻度的麻醉，每只小白鼠滴10%感染悬液0.03~0.05ml，如为阳性结果时，则小白鼠很快出现弓背、不爱活动、呼吸困难等症状，可在8~18天内死亡。如果症状逐渐减轻，说明衣原体的毒力弱，在这种情况下，必须于21日后进行盲目传代。解剖时常可见肺脏有实变，有时整个肺叶发生实变。如出现特异性肺炎病灶，呈灰色、半透明，直径为1~3mm，全肺从外表看像正常肺，说明滴鼻用的感染材料稀释度过大，可适当调正，一般在感染后10天的肺脏涂片中可见原体，但数量较少，如继续传代，则可取得良好的结果。应特别注意的是，鼻腔感染易造成气溶胶，发生人身感染事故，应有严密的防护装置，杜绝人身感染和环境污染，方可采用此法。

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