脱纤维羊血在培养基中的应用

  脱纤维羊血是通过无菌技术采集健康绵羊全血，经物理方法（如玻璃珠摇床振荡）去除纤维蛋白原制成的血液制品，其核心特性是无菌、无抗凝剂添加、保留血液天然活性成分，可有效避免血液凝固对培养基性能的影响，是微生物培养、细胞培养及相关科研、临床实验中常用的优质培养基补充成分，广泛应用于临床微生物学、基础医学研究、生物制药等多个领域。

一、脱纤维羊血在培养基中的核心应用基础

  脱纤维羊血富含血红蛋白、血清白蛋白、球蛋白、甘油三酯、氨基酸、维生素及多种生长因子（尤其是X因子和V因子），这些成分能够弥补基础培养基（如哥伦比亚血琼脂培养基）营养单一的不足，为微生物生长繁殖提供必需的营养物质和生理环境。同时，其经脱纤维处理后，去除了会导致血液凝固的纤维蛋白，既避免了培养基凝固结块，又保留了血液的天然活性，不会对微生物生长和实验结果造成干扰，这也是其区别于普通羊血、成为培养基优选补充剂的核心原因。此外，脱纤维羊血来源稳定、成本相对可控，且安全性高于人血（可避免HIV、肝炎等病原体传播风险），进一步扩大了其在培养基中的应用范围。

二、脱纤维羊血在培养基中的具体应用场景

1、微生物培养领域：核心用于苛养菌的分离与增殖

  脱纤维羊血最主要的应用场景是制备血琼脂培养基，用于营养要求苛刻的微生物（苛养菌）的分离、纯化和增殖培养。这类微生物自身无法合成生长所需的全部营养物质，依赖脱纤维羊血提供的特殊生长因子才能存活和繁殖。

  常见适用的苛养菌包括链球菌属（如化脓性链球菌、肺炎链球菌）、嗜血杆菌属、布鲁氏菌属、厌氧菌（如拟杆菌属）等，脱纤维羊血中的X因子（血红素）和V因子（辅酶）是这类微生物生长不可或缺的关键物质，能够显著提高其分离阳性率和增殖效率。在临床实验室中，将脱纤维羊血加入基础琼脂中制成血平板，可用于痰液、脓液、脑脊液、咽喉拭子等临床标本的微生物分离，帮助筛选出目标致病菌，为疾病诊断提供依据；在科研领域，可用于苛养菌的纯培养，为后续的菌株鉴定、基因测序等实验提供足量、纯净的菌源。

图1 血液琼脂培养基微生物生长情况

注：a：蜡样芽孢杆菌，b：金黄色葡萄球菌，c：乙型溶血性链球菌

2、细菌鉴别领域：基于溶血现象的菌株分类

  脱纤维羊血可通过观察细菌生长过程中的溶血活性，实现对细菌的分类鉴别，这是其在微生物诊断中的重要应用之一。不同菌株对血液中红细胞的破坏能力不同，在含脱纤维羊血的血平板上会呈现不同的溶血模式，据此可快速区分菌株类型，辅助临床诊断和菌株鉴定。

  具体溶血模式分为三类：一是β溶血（完全溶血），细菌产生的溶血素可完全破坏红细胞，形成透明的溶血环，常见于乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌；二是α溶血（不完全溶血），红细胞被部分破坏，形成草绿色的溶血环，常见于肺炎链球菌；三是γ溶血（不溶血），细菌不产生溶血素，血平板上无溶血环，常见于表皮葡萄球菌。此外，脱纤维羊血还可用于特殊鉴别试验，如协同溶血试验（CAMP）试验，辅助鉴别单增李斯特氏菌等菌株，进一步提高鉴别准确性。

图2 不同菌株在哥伦比亚血琼脂培养基上的菌落特征

图3 单增李斯特氏菌的协同溶血试验结果

3、药敏测试领域：优化抗生素敏感性检测效果

  在抗生素敏感性测试中，脱纤维羊血可用于制备Mueller-Hinton血琼脂等专用培养基，为细菌生长提供适宜环境，确保药敏测试结果的准确性和可靠性。部分苛养菌在普通药敏培养基上生长不良，无法形成清晰的菌落，导致药敏结果误判，而添加脱纤维羊血后，可显著改善其生长状态，便于准确测量抑菌圈直径，判断细菌对不同抗生素的敏感程度。

  研究表明，脱纤维羊血制备的药敏培养基，其检测效果与商业标准培养基相当，甚至优于含人血或其他动物血的培养基，尤其适用于肺炎链球菌、幽门螺旋杆菌等苛养菌的药敏测试，为临床合理用药提供科学依据。

4、其他拓展应用

（1）细胞培养辅助

  在部分动物细胞培养中，脱纤维羊血可作为天然营养补充剂，替代部分血清，为细胞生长提供蛋白质、生长因子等营养成分，帮助维持细胞活性和贴壁能力，尤其适用于部分难培养细胞的初代培养。

（2）疫苗研发与生物制药

  在疫苗生产过程中，脱纤维羊血可用于制备培养病原体的培养基，为疫苗菌株的增殖提供适宜环境，确保疫苗菌株的活性和纯度；同时，也可用于生物制药中工程菌的培养，辅助实现目标产物的高效表达。

（3）血清学实验

  可作为实验材料参与血清学反应，利用抗原-抗体特异性结合原理，辅助检测未知细菌或制备诊断血清，用于微生物的快速鉴定。

三、脱纤维羊血在培养基应用中的核心优势

1、营养全面且活性稳定

  脱纤维处理采用物理方法，未添加任何抗凝剂、防腐剂和抗生素，可最大程度保留血液中的天然营养成分和生物活性因子（如X因子、V因子），且在45℃-50℃的培养基制备常用温度下，仍能稳定保持活性，满足苛养菌生长需求。

2、安全性高且无干扰

  原料来自健康筛查合格的绵羊，经无菌采集和多重无菌检测，不含细菌、真菌、支原体等有害微生物，可避免实验污染；同时，去除纤维蛋白后，不会出现凝固现象，也不会对微生物生长、溶血反应及药敏测试造成干扰，实验重复性好。

3、性价比高且来源稳定

  相较于商业标准羊血或人血，脱纤维羊血成本更低，且绵羊养殖广泛，血源供应稳定，可满足临床实验室、科研机构的大规模使用需求，尤其适合资源有限地区的微生物检测工作。

4、适用性广

  可适配多种基础培养基（如哥伦比亚琼脂、布鲁氏菌琼脂、Mueller-Hinton琼脂），适用于多种苛养菌的培养、鉴别和药敏测试，同时可拓展应用于细胞培养、疫苗研发等多个领域。

四、脱纤维羊血在培养基应用中的注意事项

  1、储存条件：需在2℃-8℃冷藏密封保存，严禁冷冻，否则会导致血液中蛋白成分变性、生长因子失活，影响应用效果；未开封产品保质期通常为1个月，开封后需在2周内使用完毕，避免污染和成分失效。

  2、恢复室温和使用：使用前需采用室温逐步升温法解冻，避免快速升温或直接加热，防止蛋白变性；解冻后若出现少量沉淀物，属于正常现象，无需特殊处理，轻轻颠倒混匀即可使用。

  3、无菌操作：整个使用过程需严格遵循无菌原则，实验台面、器械需彻底灭菌，操作人员做好手部消毒，避免引入杂菌污染脱纤维羊血和培养基，影响实验结果。

  4、运输与处理：避免超长时间、超远距离运输，运输过程中防止剧烈震荡，以免导致红细胞破裂出现溶血现象；若出现溶血严重，应禁止使用，可通过离心后PBS洗涤去除破碎红细胞（必要时）。

  5、用量控制：根据培养基类型和实验需求控制添加量，常规血琼脂培养基中脱纤维羊血的添加比例为5%-10%，用量过多或过少都会影响微生物生长和溶血反应的观察。

五、应用总结

  脱纤维羊血凭借其营养全面、活性稳定、安全性高、性价比高的优势，成为培养基中不可或缺的重要补充成分，其核心应用集中在苛养菌的分离培养、细菌鉴别和抗生素敏感性测试，同时在细胞培养、疫苗研发等领域也具有广泛的应用前景。在实际应用中，严格遵循储存、解冻、无菌操作等注意事项，可充分发挥其优势，确保实验结果的准确性和可靠性，为临床诊断、基础科研和生物制药提供有力支撑。

六、产品展示

  我公司有各种含脱纤维羊血的培养基，客户可根据实际情况和用途进行选用。

表1 产品信息

注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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