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一、用途及实验原理
用途：用于植物乳杆菌分离计数培养。
原理：蛋白胨、酵母粉为微生物的生长提供氮源，维生素及生长因子；麦芽糖为植物乳杆菌可发酵的糖类；磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌并中和细胞毒性物质，为乳酸菌提供一个良好的生长环境；琼脂是培养基的凝固剂；溴甲酚紫为酸碱指示剂；万古霉素可抑制瑞士乳杆菌等非植物乳杆菌。
二、培养基配方（g/L）
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
酵母浸粉 |
4.0 |
|
吐温-80 |
1.0 |
|
K2HPO4•7H2O |
2.0 |
|
乙酸钠（3H2O） |
5.0 |
|
柠檬酸三铵 |
2.0 |
|
MgSO4•7H2O |
0.2 |
|
MnSO4•4H2O |
0.05 |
|
麦芽糖 |
10.0 |
|
溴甲酚紫 |
0.005 |
|
万古霉素 |
0.01 |
|
琼脂 |
15 |
|
pH值6.0±0.1（25℃） |
|
三、试验方法
1. 称取本品49.3 g，加热溶解于1000 mL蒸馏水中，分装试管，121℃高压灭菌15分钟，备用。
2.10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基（LP-MRS培养基HB9277）以及参比培养基（MRS琼脂HB0384-88-100）。
3. 放置于36℃需氧培养24小时-48小时，观察试验结果。
四、结果观察
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36℃需氧培养24小时-48小时。培养结果如图1。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
参比或计数培养基 |
生长情况 |
其它特征 |
|
植物乳杆菌 |
ATCC 8017 |
10-100 |
MRS |
+++ |
白色圆形凸起菌落 |
|
嗜酸乳杆菌 |
CICC 6005 |
/ |
MRS |
- |
抑制 |
图1 质控菌株在LP-MRS培养基的生长情况
五、注意事项
1. 培养基中有少量的硫酸镁和硫酸锰，灭菌后可能出现微量沉淀，不影响使用。
2. 因产品含有吐温的原因，高压灭菌后会液体会出现浑浊现象，随着冷却放置后液体变澄清。
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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