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一、试验原理
用途:用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB、中国药典标准)。
原理:蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;牛胆盐可抑制革兰氏阳性细菌的生长;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫是pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色。
二、培养基配方(g/L)
|
蛋白胨 |
20.0 |
|
乳糖 |
10.0 |
|
牛胆盐 |
5.0 |
|
溴甲酚紫 |
0.01 |
|
pH值7.4±0.2(25℃) |
|
三、试验方法
1、称取本品35.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的20 mm×150 mm试管中,每管10 mL,121℃高压灭菌15 min,备用。
2、制备质控菌株,做10倍系列梯度稀释,选择适宜稀释度的菌悬液,接种至培养基中。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养24 h±2 h。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃的恒温培养箱中,需氧培养24 h±2 h。试验结果如图1所示。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其它特征 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
产酸产气 |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
+++ |
浑浊不产气 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
1000-5000 |
- |
抑制 |
|
弗氏柠檬酸杆菌 |
ATCC 43864 |
10-100 |
+++ |
产酸不产气 |
|
阴沟肠杆菌 |
ATCC 23355 |
10-100 |
+++ |
产酸不产气 |
|
产气肠杆菌 |
ATCC 13048 |
10-100 |
+++ |
产酸不产气 |
图1乳糖胆盐发酵培养基的质控菌株培养结果
五、试验注意事项
1、灭菌结束后,应尽快取出,冷却至室温使用。
2、使用前,若小倒管中有剩余气体,应排除小倒管中的气体。
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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