Skirrow's培养基

【原理】

  该培养基含有丰富营养物，附加抗菌补充剂，其中三甲氧苄氨嘧啶(trimethoprimTMP)是一广谱抗菌剂，其抗菌谱和磺胺药相似，但对链球菌及大多数革兰氏阴性菌的抗菌作用较磺胺嘧啶强，与其它两种抗生素合用有协同作用，能增强杀菌和抑菌作用；其中，万古霉素是一窄谱抗生素，仅对革兰氏阳性菌有较强的杀菌和抑制作用，多粘菌素B仅对革兰氏阴性菌。这些抗生素并不抑制空肠及幽门弯曲菌生长，但可抑制其它杂菌生长，故为弯曲菌选择分离培养基。

【成分】

【制法】

  (1)TMP抗生素混合液配法：先配成乳酸TMP溶液，即将乳酸62mg(约1~2滴)加于100ml灭菌蒸馏水中，然后加入TMP100mg，混合后加热100℃灭菌，即为乳酸TMP溶液。取该液5ml,再加入万古霉素100mg和多粘菌素 B0.38mg,摇匀后即成TMP抗生素混合液;

  (2)除TMP抗生素混合液和羊血外，将其它成分溶于1000ml蒸馏水中，混匀，加热溶解，调整至pH7.4,装瓶，每瓶100ml,121℃灭菌15分钟，备用；

  (3)脱纤维羊血的制备：取一洁净玻璃瓶，加入玻璃珠数十粒，瓶口塞以棉塞并用油纸包扎瓶口，121℃灭菌15分钟并干燥后备用。采血时,以无菌操作抽取羊血或兔血

注入含有玻璃珠的无菌瓶中，加塞，轻轻连续摇动10~15分钟，以脱去纤维蛋白；

  (4)血液琼脂的制备：取制就的Skirrow's琼脂一瓶，煮沸，使之溶解，待溶解的Skirrow's琼脂温度降至50~56℃时，加入脱纤维羊血7ml和TMP,抗生素混合液0.5ml,摇匀，倾注于无菌平皿上。

  (5)巧克力血琼脂的制备：其法与血液琼脂相似，但血液加入琼脂混匀后，再置

于85℃水浴中10分钟，使培养基的温度逐渐上升，血液的色泽由鲜红色变成暗棕色，似“巧克力”色。取出后待冷至45~50℃,加入TMP抗生素混合液0.5ml,摇匀，倾注于无菌平皿中。

【用途】

  供空肠弯曲菌及幽门弯曲菌感染患者胃肠粘膜组织或粪便分离培养之用。

【注意事项】

  空肠弯曲菌和幽门弯曲菌均属微需氧菌,环境中只可含5%O2及10%CO2置42~43℃培养。在较多氧气中极易死亡，尤以幽门弯曲菌为著，因此标本采集后应尽快接种至培养基上或放入运送培养基中运送（见下述)。

（第二军医大学 项兆英编 谢正旸、范中善审）

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