猪肺消化汤复合维生素B(LCVB)琼脂

【原理】

  此培基是以猪肺消化汤为基础加上羊血，复合维生素B及L半胱氨酸制成巧克力色琼脂，营养丰富，可以提供充分的碳原和氢原和军团菌生长必须的氨基酸和铁等元素(可代替需进口的可溶性焦磷酸铁)，完全可以满足该菌的生长繁殖，为国内最早研制的优良培养基。

【成分】

【制法】

  (1)猪肺消化汤：绞碎的新鲜猪肺250g，加蒸馏水800ml,浓盐酸2ml及胃蛋白酶2g，搅匀后，于56℃水浴消化75小时，取出后在水浴中煮沸10分钟终止消化，用脱脂棉过滤，加蒸馏水补足至1000ml，加酵母浸膏5g(5g蛋白胨亦可)及Tris1g,用40%氢氧化钾调整至pH6.9~7.0,再煮沸片刻，冷却后用滤纸过滤即成；

  (2)LCVB琼脂：取猪肺消化汤1000ml，加入活性炭2g、琼脂17g，121℃灭菌15分钟。于80~85℃水浴保温，加入脱纤维绵羊血100ml，使成巧克力色。待冷至60℃左右，加入注射用复合维生素B(无菌蒸馏水配成1%)10ml,L半胱氨酸(无菌蒸馏水配成4%，6号玻璃滤器过滤除菌)10ml，混匀后倾注于于无菌平皿中或制成斜面。

【用途】

  分离培养军团菌。

【注意事项】

  1.猪肺消化汤血培养基：100ml此消化汤，依次加4%盐酸半胱氨酸、2.5%硝酸铁及1%复合维生素B各0.5ml混匀后，即可接种培养病人血5ml。

  2.猪肺消化汤制液体增菌培养基：在50ml血培养基中再加入5ml绵羊血混匀即成。

  3.所有用具及操作必须严格无菌。

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