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传统微生物实验室中,配制培养基多使用玻璃容器。但由于玻璃容器存在易碎、重量大、需反复清洗等问题,现在越来越流行使用一次性塑料试管、平皿等容器,具有价格低廉、重量轻、结实方便等优点,特别是市场化的一些即用型产品,绝大多数采用一次性塑料容器,但仍然有一些培养基使用的是玻璃容器,那么用塑料容器和玻璃容器制备培养基是否存在差别呢?
一、灭菌方式的差异
玻璃材质可耐高温,因此进行灭菌时,通常采用高压蒸汽灭菌(例如121℃灭菌15-30min)或干热灭菌(例如170℃烘2-4h),而市场上的绝大多数塑料制品采用环氧乙烷灭菌或者辐照灭菌的方式,两种材质容器灭菌方式相比,环氧乙烷灭菌方式易存在残留,可能会对部分培养基的性能产生影响,而高温或辐照灭菌的方式一般不会对培养基的性能产生影响。
二、分子/原子间隙及杂质残留
玻璃的主要构成硅酸钠、硅酸钙、二氧化硅等成分,分子间隙极小(小于0.3nm),密封性非常好,水分子、氧原子均无法通过,因此使用玻璃容器盛装培养基在密闭条件下保存,培养基会更稳定,不易挥发减少或者被氧化。部分玻璃容器因生产原料或工艺的原因,可能残留有较多的钙或其他元素,配制一些含磷酸盐的培养基进行长期保存时,会逐渐反应形成极微量的沉淀。由于玻璃材质稳定,通常不会对培养基的性能产生影响。
塑料材质涉及的种类比较多,均为高分子有机聚合物,不同材质分子间的孔径跨度极大(0.7nm至数百微米),可容纳水分子、氧气分子通过,因此使用塑料容器长期保存培养基时,经常会遇到容器内培养基逐渐减少的现象,特别是温度越高,挥发越快,这并不是因为容器的密闭性差,而是因为水分子会通过塑料分子间隙缓慢“跑”出来。同样由于氧分子可以“跑”进去,培养基在保存过程会逐渐被氧化。另外一些厂家在生产塑料容器时,可能会用到一些脱模剂等化工原料,残留在容器表面,培养基长期浸泡过程中可能导致这些成分溶解到培养基中,对培养基的性能产生影响。
三、配制培养基该如何选择?
玻璃容器因其密封性好,不透氧,在配制培养厌氧菌的液体培养基时,特别适合使用玻璃容器,例如药品检验中使用的硫乙醇酸盐流体培养基,市场上的卖的即用型产品不管是瓶装的还是试管装的,几乎全是用玻璃容器装的,因为这个培养基主要是用来培养厌氧菌的,若使用塑料容器,在长期保存过程中,周围可能会有氧气渗入,导致培养基性能变弱。即使是现配现用的培养基,也适合用玻璃容器。玻璃容器由于其耐热性强,在实验室中也几乎都是使用玻璃容器装培养基直接灭菌的。而塑料材质的由于其存在透氧的特性,再进行一些需氧菌培养时,用塑料试管反而会比玻璃试管更好用,例如常用的TSB培养基,如果分装试管直接灭菌使用,在未震荡的条件下,下层也会形成厌氧的环境,这个时候接种需氧菌就会生长较差,只在表面生长或者不生长,如果是将培养基先行灭菌再分装至塑料试管,接种需氧菌则会很快生长。对于平皿,现在基本上塑料和玻璃的差别不大,使用塑料平皿已经远远多于使用玻璃平皿的了,但需注意尽可能选择经辐照灭菌的一次性塑料平皿,因环氧乙烷灭菌的平皿会对部分培养基产生影响。
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