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结论
配制培养基,必须在高压灭菌之前测定并调整pH,灭菌后不准再调pH。
原因
1. 高温高压会改变pH值
121℃高压灭菌过程中,培养基的酸碱度会发生偏移:
-含糖培养基:高温分解产酸,pH会明显下降;
-普通肉汤、琼脂培养基也会出现小幅pH变动。
只有灭菌前调好,灭菌冷却后的pH才能落在标准范围。
2. 灭菌后调pH存在两大问题
-无菌条件下加酸碱,容易带入杂菌造成整批污染;
-酸碱来不及混匀,局部pH偏差大,会抑制细菌生长。
3. 标准操作流程
称量溶解→冷却至室温→测定pH→用酸/碱精准调至目标值→分装→高压灭菌。
补充要点
-缓冲体系较好的培养基(比如含磷酸盐)pH变化小,也建议前置调pH;
-选择性培养基、显色培养基对pH极其敏感,灭菌前调pH是硬性要求。
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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