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【原理】
培基中所含的庆大霉素和多粘菌素主要抑制革兰氏阴性细菌生长,十二烷基硫酸钠和利凡诺(雷佛奴尔)主要抑制革兰氏阳性细菌生长繁殖,这4种药品还有协同作用,加上亚碲酸钾对革兰氏阴性细菌和革兰氏阳性球菌也有抑制生长作用,故此培养基抑制杂菌的能力很强。另一方面,由于亚硫酸钠和柠檬酸钠有促进霍乱弧菌生长的作用,胆汁有保护霍乱弧菌和促进其生长的双重作用,霍乱弧菌又能使亚碲酸钾还原成碲,菌落中心呈黑色,因此该培养基上生长繁殖的中心黑色,边缘淡黄色的霍乱弧菌大菌落与其它杂菌的小菌落很容易区别。
【成分】
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蛋白胨 |
1~2% |
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氯化钠 |
0.5% |
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牛肉膏 |
0.3% |
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亚硫酸钠(无水) |
0.3% |
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柠檬酸钠 |
1% |
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猪胆汁粉 |
0.5% |
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十ニ烷基硫酸钠 |
2% |
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利凡诺(雷佛奴尔) |
0.3% |
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琼脂 |
1.5% |
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庆大霉素亚碲酸钾混合液 |
0.1% |
【制法】
将1~8成分放于玻璃或搪瓷容器内(严禁用铝制等金属容器,加入蒸馏水,加热溶解混合后,调整至pH8.0,然后按1.5%加入琼脂,煮沸至琼脂溶化后,分装,121℃灭菌15分钟,冷至60℃左右,按每100ml琼脂基加入庆大霉素亚碲酸钾混合液(1ml 4万u庆大霉素加79ml蒸馏水混合后,加入0.8g亚碲酸钾溶解混合即成,每ml含500u的庆大霉素和1%亚碲酸钾)0.1ml,摇匀,倾注于平皿中。
【用途】
本培养基远比国外用的TCBS琼脂抑制杂菌的能力还强,用于霍乱弧菌粪便标本的检验,具有检出速度快、检出率高、观察省时等特点。E1Tor弧菌的最小检出菌量较常用的“庆大”、“双洗”等琼脂高2~10倍稀释度。当粪便标本中每毫升含E1Tor弧菌14~10万个时,4号琼脂中8小时即可作出初步报告,若E1Tor弧菌含量更多,检出时间还可缩短。
【注意事项】
庆大霉素配制后,要保存于冰箱中,备用,但不能长期使用,1~2周后要新配。
●猪胆计粉制法:取新鲜猪胆汁煮沸浓缩成膏状后,倒入搪瓷盘内置60~80℃烤箱中烤2~3天,干后即成,贮放在密封的玻璃瓶中。每600ml胆汁可制胆汁粉100g。
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