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微生物培养基的更迭进步

刘浩然
录入时间:2026/10/13 16:42:49 来源:青岛海博生物

微生物培养基是微生物培养、分离、鉴定与计数工作的核心基础载体,广泛应用于食品药品检测、医疗卫生、环境监测、生物科研等诸多领域。培养基的产品形态与制备模式,直接决定微生物检测的操作难度、检测成本、实验重复性以及数据精准度。从微生物学科发展初期至今,行业围绕简化操作流程、降低污染风险、压缩检测成本、适配多元检测场景四大核心目标,持续对培养基进行优化升级。行业产品历经多轮更新迭代,逐步完成从基础干粉培养基到各类即用型预制培养基,最终升级为集成化测试片的变革,全方位适配实验室标准化检测、生产现场快速筛查、高通量批量检测等不同应用场景。本文将完整梳理培养基全阶段发展脉络,剖析各类型培养基的技术特点、优劣之处,并结合实际产品案例阐述其应用价值。


一、经典的干粉培养基

1.干粉培养基的简介

干粉培养基是最早实现工业化量产、也是微生物领域普及时间最久的培养基形态,至今仍是各大基础实验室、大型检测机构的常备产品。该类培养基是将蛋白胨、琼脂、无机盐、生长因子等基础原料,按照国标、药典等统一配比混合,经脱水研磨、筛分处理制成干燥粉末状成品,使用前需实验人员自行完成称量、溶解、高温灭菌、分装倾注等全套操作。

在行业发展早期,科研人员需自主采购各类原料手动配比配制培养基,原料纯度不一、配比误差较大,极易引发实验失败。干粉培养基的问世,彻底解决了自主配液的痛点,统一的原料配比让微生物培养体系初步实现标准化。目前市面上主流产品涵盖通用类、致病菌专用类两大类别,典型代表有PCA平板计数干粉培养基、胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)干粉培养基、月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)干粉培养基,分别用于菌落总数计数、广谱微生物培养、大肠菌群检测,适配食品、水质等常规检测项目。示例海博胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)干粉培养基以及接菌培养图片如图1所示。

 

TSA干粉培养基样式   TSA培养的大肠埃希氏菌ATCC25922

图1 海博胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)干粉培养基示例

2.干粉培养基的核心优势与短板

优势主要分三个方面,一是成本的性价比极高:工业化批量生产降低原料与制备成本,相较于各类即用型预制培养基,单价成本最低,适合预算有限、检测频次极高的大型实验室;二是储存与运输便捷:干粉状态化学性质稳定,密封避光条件下保质期可达2-3年,占用仓储空间极小,运输无特殊温控要求,适配全国各类地区采购使用;三是使用灵活性强:实验人员可根据单次检测需求,自由配制任意体积的培养基,不受固定规格限制,适配小型实验调试与大规模批量检测。

短板主要分三个方面,一是操作流程繁琐耗时:完整操作需历经称量、加热溶解、高压灭菌、恒温降温、倾注平板五大步骤,单次制备耗时2-3小时,对操作人员专业能力要求较高;二是人为误差与污染风险高:人工称量易产生剂量偏差,加热溶解、倾注分装环节易出现杂菌污染,同时高温灭菌不当会破坏培养基内热敏性营养成分,直接影响菌落生长状态;三是作业环境隐患突出:传统细粉状培养基易产生扬尘,不仅会造成原料浪费,还会刺激操作人员呼吸道,部分特异性培养基粉尘还可能引发交叉污染,影响其他实验组数据。现阶段已有企业推出颗粒型干粉培养基,粉尘量大幅降低、溶解效率更高,但并未从根本上简化制备流程。


二、多元化的即用型培养基

随着微生物检测行业标准化、规范化发展,第三方检测机构、食品生产企业质控实验室数量激增,行业对培养基的便捷性、稳定性要求大幅提升。干粉培养基人工依赖度高、误差不可控的弊端逐渐凸显,即用型预制培养基应运而生。该类培养基由生产厂家统一完成配制、灭菌、分装、质检等全套工序,无菌封装后直接售卖,用户开箱即可使用,无需二次加工。根据封装形态与应用场景差异,即用型培养基细分为平板、管装、袋装、瓶装四大品类,差异化覆盖不同检测需求。

1.即用型平板培养基

即用型平板培养基是最早落地普及的预制类培养基,厂家将灭菌后的液态培养基,在无菌车间直接倾注至一次性无菌培养皿中,待其自然凝固后密封包装。该产品完美适配传统涂布法、倾注法检测模式,无需用户配制倒板,是目前中小型实验室最常用的即用型产品。常见产品包括无菌PCA计数平板、孟加拉红真菌专用平板、沙门氏菌显色平板,多用于食品菌落总数、霉菌酵母菌、致病菌筛查等常规检测项目。示例即用型孟加拉红培养基平板(9 cm)以及接菌培养图片如图2所示。

即用型平板样式  接菌示例图

图2 即用型孟加拉红培养基平板(9 cm)示例

优势主要分三个方面,一是极致简化操作,零配制门槛,开箱即可直接接种培养,将预备时间压缩至5分钟以内;二是厂家标准化生产,批间误差极小,菌落生长状态稳定,实验重复性远高于自配干粉培养基;三是有效规避人工操作引发的污染问题,降低新人上手难度。

短板主要分三个方面,一是平板为固态成型结构,占用仓储与运输空间大,运输过程易碎裂破损;二是产品单价偏高,长期高频检测会大幅增加实验室运营成本;三是保质期较短,常规琼脂平板保质期仅4-8周,无法大批量囤货。

2.即用型管装培养基

即用型管装培养基以无菌试管为承载容器,分为液态增菌培养基与斜面固态培养基两种类型,主要针对微生物增菌培养、菌种保藏、生化鉴定等细分场景。广泛应用于致病菌初步富集、菌种短期保存、微生物生化特征鉴定。液态增菌培养基,如支原体采样管等,支原体采样管以及接菌培养图片如图3所示。



图3 支原体采样管(即用型液体管)示例

斜面固态培养基,如沙氏葡萄糖琼脂培养基管等,沙氏葡萄糖琼脂培养基管以及接菌培养图片如图4所示。


斜面管接菌示例图

图4 沙氏葡萄糖琼脂培养基管(即用型固体管)示例

优势主要分别三个方面,一是单支独立无菌封装,规格统一,适配批量增菌实验与自动化生化检测设备;二是试管密封性优异,培养基不易挥发变质,保质期优于预制平板;三是体积小巧,存放规整,适配试管架、恒温培养箱等常规实验设备。

短板主要分为三个方面,一是应用场景局限性较强,仅适用于增菌、保藏与生化试验,无法用于菌落计数、菌种分离纯化;二是固态斜面培养基运输颠簸易出现表层开裂,影响菌种接种效果;三是定制化小众生化培养基品类较少,难以覆盖特殊科研需求。

3.即用型袋装培养基

即用型袋装培养基采用无菌复合铝箔袋进行密封封装,以液态培养基为主,单袋容量多为100 mL、225 mL、500 mL,完美匹配微生物检测均质稀释标准体积,主打大批量样品前处理与批量增菌作业。典型产品有无菌生理盐水稀释液、缓冲蛋白胨水(BPW)、无菌磷酸盐缓冲液,是食品微生物检测中样品稀释、致病菌预增菌的专用耗材。225 mL无菌生理盐水稀释液如图5所示。

图5 即用型225 mL无菌生理盐水稀释液示例

优势主要分为三个方面,一是包装轻便柔软,仓储堆叠利用率高,运输成本低廉;二是容量贴合国标检测稀释比例,无需二次量取配比,大幅提升样品前处理效率;三是铝箔袋避光密封,能有效延缓培养基成分氧化变质,保质期可达6-12个月。

短板主要分为三个方面,一是仅涵盖液态稀释液、增菌液品类,无固态琼脂培养基,无法直接用于菌落培养计数;二是开封后需一次性用完,剩余培养基无法长期保存,易造成耗材浪费;三是低温环境下部分液态培养基易析出结晶,需水浴复温后才可使用。

4.即用型瓶装培养基

即用型瓶装培养基以无菌塑料瓶、玻璃瓶为容器,涵盖液态、半固态、固态三类形态,是综合性价比最高的预制培养基品类,也是近年来高通量实验室的首选产品。相较于袋装产品,瓶装密封性能更强;相较于平板产品,仓储成本更低。主流产品包含瓶装蛋白胨水、瓶装麦康凯培养基、瓶装营养肉汤,可兼顾样品稀释、菌落培养、菌种增菌等全流程操作。瓶装蛋白胨水如图6所示。

图6 瓶装蛋白胨水示例

优势主要分为四个方面,一是功能全面,一材多用,适配绝大多数微生物检测项目;二是成本优势显著,价格仅为同款即用型平板的30%左右,且仓储占用空间减少70%以上;三是开盖后可分次取用,剩余培养基密封保存仍可短期使用,耗材利用率更高;四是可节省前期制备时间。

短板主要为玻璃瓶产品自重较大,运输成本高于袋装产品,且存在破碎风险。


三、简易测试片培养基

在即用型各类培养基基础上,为适配食品生产现场快速筛查、野外环境应急检测、基层简易实验室检测等轻量化场景,行业推出迭代升级产品——微生物测试片。测试片属于高度集成化的微型培养基系统,摒弃传统培养皿、试管、瓶袋等承载容器,将脱水营养基质、冷水可溶性凝胶、特异性显色指示剂、抑菌因子等成分,预先固化封装于超薄无菌胶片内部,整体结构轻便小巧,是目前技术最先进、操作最简单的培养基形态。我公司现有菌落总数(AC)测试片、大肠菌群(CC)测试片可供,肠杆菌科(EB)测试片和酵母霉菌(YM)测试片也即将上市。

菌落总数(AC)测试片以及接菌培养图片如图7所示。


菌落总数(AC)测试片 AC测试片培养的金黄色葡萄球菌ATCC 6538

图7 菌落总数(AC)测试片示例

大肠菌群(CC)测试片以及接菌图片如图8所示。

图8 大肠菌群(CC)测试片示例

测试片优势主要分为四个方面,一是操作极简,零制备成本:无需加热、灭菌、复融等任何前置操作,仅需滴加样品匀液,盖上覆膜即可完成接种,单份样品操作时长不足1分钟,零基础人员亦可快速上手;二是极致节约资源:单片测试片厚度较小,仓储占用空间相较于传统平板减少85%,运输成本大幅降低;无需培养皿、移液管、灭菌锅等配套设备,适配无专业实验室的生产现场;三是检测高效,数据直观:内置专属显色指示剂,微生物繁殖后会形成特异性有色菌落,无需辅助染色即可直接判读,部分品类检测周期可缩短50%;同时配套专用判读仪,规避人工计数误差;四是安全性更高:封闭式培养结构,隔绝外界杂菌污染,同时减少操作人员直接接触致病菌的概率,降低生物安全风险。

短板主要分为三个方面,一是单品单价偏高:单片测试片采购成本高于传统干粉培养基与瓶装预制培养基,大规模高频次检测会增加运营成本;二是应用范围受限:当前测试片品类主要聚焦菌落总数、常见致病菌、真菌等基础检测项目,小众菌种、特殊微生物的培养与鉴定暂无适配测试片,无法满足高端科研需求;

三是储存条件严苛:多数测试片需2℃-8℃冷藏储存,不可冷冻存放,仓储管控要求高于干粉与常规即用型培养基。


四、微生物培养基发展总结及展望

纵观微生物培养基完整迭代路径,本质是行业从“人工自主制备”向“工业化预制”,再向“集成化智能化”的进化全过程。每一代产品的更新,并非对前代产品的彻底淘汰,而是形成互补共存的行业格局:低成本的干粉培养基适配大型科研机构、国家级检测实验室;各类即用型预制培养基差异化覆盖中小型实验室的常规检测;轻量化测试片则深耕生产现场、基层筛查、应急检测等细分场景。

结合当下行业发展趋势来看,未来微生物培养基将朝着两大方向持续升级:一是优化测试片技术,丰富小众菌种配套品类,降低产品单价,打破成本应用壁垒;二是推动培养基与自动化设备、AI智能判读系统深度绑定,打造“预制培养基+自动化接种+智能菌落判读”一体化检测方案,进一步解放人力,实现微生物检测的标准化、高效化、智能化,为食品药品安全、公共卫生防控、生物科研发展筑牢底层技术根基。


五、培养基信息汇总

我公司现有各式各样的培养基,供广大朋友参考,上文示例培养基的具体信息如表1所示。不局限于以上培养基,更多的培养基可参考我公司官网。

表1 培养基罗列

培养基名称

培养基类型

使用方式

产品货号

胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)

干粉培养基

称取本品40.0 g,加热搅拌溶解于1000 ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟

HB0177

孟加拉红培养基平板(9 cm)

即用型平板

打开包装,直接使用

HBPM023

支原体采样管

即用型管装培养基-液体管

采样前打开包装,取出采样拭子和采样管,在规定的采样部位进行样本采集,将采集完的拭子放入采样管中

HBPT077

沙氏葡萄糖琼脂培养基管(长斜面)

即用型管装培养基-固体管

打开包装,在斜面上划线

HBPT0253-81-2

225 mL无菌生理盐水稀释液

即用型袋装培养基

打开包装,直接使用

HBJ015-1

0.1%蛋白胨水瓶装(250 mL)

即用型瓶装培养基

打开包装,按需取用

HBPP5218-250

菌落总数(AC)测试片

测试片

撕开上膜,滴加菌液,覆盖上膜,培养

RTCSP001

大肠菌群(CC)测试片

测试片

撕开上膜,滴加菌液,覆盖上膜,培养

RTCSP002


注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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