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【原理】
在此培养基上培养白喉棒状杆菌以进行平皿中毒力试验,试验菌株若产生毒素,即和纸条上渗出的抗毒素结合,而出现放射形的沉淀线。
【成分】
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牛肉消化液 |
300ml |
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麦芽糖 |
1g |
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10℅乳酸瑢液 |
2ml |
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氯化钠 |
1.5g |
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琼脂 |
3~4.5g |
【制法】
(1)产毒素平皿中培养基:先将琼脂与氯化钠混入牛肉消化液150ml中,加热溶解,再将乳酸和麦芽糖溶于另一份牛肉消化液150ml内,调整至pH7.8;将两者混匀、加热,再调整至pH7.8。用脱脂棉花过滤,使呈透明,分装,每管10ml,于100℃流动蒸汽灭菌1小时,连续2天,完毕后,保存于4℃冰箱内备用。
(2)抗毒素干燥滤纸条:取优质滤纸,切成15mmX70mm大小,每10条置一平皿。将平皿用纸包妥,121℃灭菌30分钟,取出置干燥箱(100℃)烤干;取白喉抗毒素一瓶用无菌蒸馏水稀释至1000u/ml;每10条已经灭菌的滤纸条上,加入1000u/ml的抗毒素1ml,务必慢慢滴加使所有纸条充分均匀吸收,加完后,仍将平皿包好,置37℃孵箱内约2天烘干,保存冰箱或室温中备用,有效期可达一年以上。
(3)平皿毒力试验培养基,需用时,将分装成每管10ml的产毒平皿培养基,置于沸水中溶化,待冷却至55℃左右,倾注于于9cm平皿内,凝固后,放入37℃孵育箱内,烘干表面水分,表面太湿太干均能影响抗毒素的均匀渗透;用无菌镊子取预先制备的抗毒素干燥滤纸条,贴于平皿中央的琼脂表面,待纸条充分吸湿后,即可接种试验菌株。
【用途】
测定白喉棒状杆菌毒力。
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