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一、实验原理
用途：用于铜绿假单胞菌的选择性分离培养。
原理：具有乙酰胺酶的细菌能利用乙酰胺作为碳源，并分解乙酰胺产碱；氯化钠维持均衡的渗透压；无水磷酸氢二钾和无水磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供生长必要的离子；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH指示剂。
二、培养基配方（g/L）
|
乙酰胺 |
10.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
磷酸氢二钾 |
1.39 |
|
磷酸二氢钾 |
0.73 |
|
硫酸镁 |
0.5 |
|
酚红 |
0.012 |
|
琼脂 |
20 |
|
pH值7.2±0.1（25℃） |
|
三、试验方法
1. 称取本品37.6g，加热煮沸溶解于1000mL蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15min，备用。
2.10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基（HB5183-1乙酰胺培养基）以及参比培养基（HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）（参比培养基））。
3. 放置于36℃±1℃需氧培养24h±2h，观察试验结果。
四、结果观察
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置于36℃±1℃需氧培养24 h±2 h。培养结果如图1。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 （CFU） |
参比或计 数培养基 |
方法 |
质控结果 |
其它特征 |
|
铜绿假单胞菌 |
ATCC 9027 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
扁平菌落，边缘不整齐，周围略带粉红色 |
|
铜绿假单胞菌 |
ATCC 27853 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
扁平菌落，边缘不整齐，周围略带粉红色 |
|
大肠杆菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑制 |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑制 |
图1 质控菌株在乙酰胺培养基的生长情况
五、注意事项
培养基中含硫酸镁、乙酰胺，灭菌后有少量沉淀，摇匀后不影响使用。
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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