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一、试验原理
用途：用于HGMF膜法培养大肠菌群（AOAC标准）。
原理：胰蛋白胨、大豆胨提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；硫酸镁提高大肠菌群在滤膜上的回收率；琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）
|
胰蛋白胨 |
15.0 |
|
大豆胨 |
5.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
蛋白胨 |
5.0 |
|
硫酸镁 |
1.5 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH值7.3±0.2（25℃） |
|
三、试验方法
1、称取本品41.5g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。
2、制备质控菌株，做10倍系列梯度稀释，选择适宜稀释度的菌悬液，接种至待测培养基和参比培养基（HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂（TSA））。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，需氧培养18h-24h。
四、质控结果
接种以下质控菌株，放置于36℃±1℃的恒温培养箱中，需氧培养18h-24h。试验结果如下图所示。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 （CFU） |
回收率 |
其它特征 |
|
大肠埃希氏菌 |
CMCC(B) 44102 |
50-250 |
≥70% |
无色大菌落 |
|
金黄色葡萄球菌 |
CMCC(B) 26003 |
50-250 |
≥70% |
有黄色色素 |
|
铜绿假单胞菌 |
CMCC(B) 10104 |
50-250 |
≥70% |
有绿色色素 |
|
乙型副伤寒沙门氏菌 |
CMCC(B) 50094 |
50-250 |
≥70% |
无色大菌落 |
|
枯草芽孢杆菌 |
CMCC(B) 63501 |
50-250 |
≥70% |
白色不规则菌落 |
|
黑曲霉 |
CMCC(F) 98003 |
50-250 |
≥70% |
白色菌丝（25℃培养48h-72h） |
|
白色念珠菌 |
CMCC(F) 98001 |
50-250 |
≥70% |
白色菌落（25℃培养72h） |
图1质控菌株菌悬液在TSA上的计数结果
图2胰化大豆硫酸镁琼脂（TSAM）培养基的质控菌株培养结果
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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