《水生微生物实验法》——水中绿脓杆菌的分离检验

绿脓杆菌隶属于假单胞菌属，与人类的外耳炎和其他传染病有关。常由带菌者传播于水中，如港湾水、河水、池水，尤其是游泳场（池）及浴池，常因管理或消毒不当而在其水中含有这种致病菌.

1 ．培养基制备

（1）天门冬增菌肉汤：

天冬酰胺2 克

无水K₂HPO₄    1 克

无水KH₂PO₄   10 克

MgSO₄·7H₂O   0.5 克

甘油8 毫升

蒸馏水1000毫升pH 6.9-7.2

( 2 ）乙酰胺肉汤：

乙酰胺10 克

NaCl  5 克

K₂HPO₄    1.39 克

KH₂PO₄   0.73克

酚红0.012克

蒸馏水1000毫升

pH 6.9-7.2

（3） Tech 培养基：

蛋白胨20克

MgCl₂   1.4 克

K₂SO₄   10 克

十六烷基三甲基溴化铵0.5 克

甘油10 毫升

蒸馏水1000毫升

2 ．增菌培养

取5-10 毫升水样接种在双倍浓度的天门冬增菌肉汤，于35±0.5 ℃ 下培养48 小时，若产生绿色或蓝色色素和带浑浊或浑浊者，可初步认为有绿脓杆菌的增殖。

3 。确定试验

取上述增菌培养液1 接种环，移种在乙酰胺肉汤中，于35±0.5 ℃ 下培养48 小时，若有紫色产生，表示水样中确定存在着绿脓杆菌。

4 ．分离

应用超滤膜法，将滤膜放于Tech 培养基上，置于35±0.5 ℃ 培养24-48 小时。典型菌落带有可溶性．能扩散的半透明的蓝色或绿蓝色色素，纯化后可供鉴定用。

其样品中的数量检查除在滤膜上计算菌落外，还可用MPN 法.

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