SS培养基有效保存期内的质量控制

材料与方法

1 材料 购入的SS干燥培养基，按分值计算法检定培养基质量；判定标准，见表1。

表 1  SS培养基合格分值

2 方法 按使用说明称取SS干燥培养基，置于三角烧瓶中，加入蒸馏水，加热煮沸至泡沫消失，冷却至50℃～60℃，在生物安全柜内倾注入已灭菌的一次性使用塑料平皿中，用包装袋密封包装，置于普通冰箱内，备用。将指示菌菌种管打开，分别接种于营养肉汤中，于 37℃培养18—24 h 。取一接种环营养肉汤菌悬液，接种在营养琼脂上，37℃培养l 8～2 4 h 。挑取单个菌落，置于营养肉汤中，制成悬液，然后作l0-6稀释，取10稀释度菌悬液置于被检定培养基平板和对照1号培养基上，用L棒涂布在整个培养基表面 (使菌落控制在50—100cfu／皿范围内) 。置于37℃培养24h 。计数菌落数，测量每个菌落直径(精确至0.02mm) ，计算平均菌落直径。 

结  果

1 菌落直径和生长率 新配制的SS培养基，分别接种3株指示菌，分别测量菌落直径和生长率。在新配制的培养基上；大肠埃希菌平均菌落直径为1.0 4 m m，生长率为11.7％；痢疾志贺菌平均菌落直径为2.06 m m，生长率为70.2％；鼠伤寒沙门菌平均菌落直径为2.35mm，生长率为101.2％。当在 4℃冰箱内密封保存10 W后；大肠埃希菌平均菌直径增大为1.81m m，生长率上升为51.4 ％；痢疾志贺菌平均菌落直径缩小为1.33mm，生长率下降为56.2％；鼠伤寒沙门菌平均菌落直径缩小为1.77 mm，生长率下降为 88.5 ％。见表 2 。  表 2 指示菌在 S S培养基上菌落直径和生长率

2 菌落直径分值和生长率  新配制的SS培养基采用分值计算法鉴定培养基，质量总分值为 100.87，其中大肠埃希菌小计分值为39.45；痢疾志贺菌小计分值为 33.76；鼠伤寒沙门菌小计分值为27.66。在4℃冰箱内存放至第6周，总分值为63.89，放至第7周，总分值降至4 9.34 < 56.125 ，见表 3 。 

表 3 指示菌在 SS培养基上菌落直径分值和生长率分值

讨 论 本次实验的 3株指示菌在 4 ℃冰箱内存放不同时间的培养基的菌落直径和生长率结果表明，随着存放时间的延长，菌落直径缩小和生长率下降，但很难判定培养基的质量优劣。

本次实验选用质量合格的SS培养基 (总分值100.87>56.125 ，其中大肠埃希菌分值为39.45>27.595，痢疾志贺菌分值33.76>13.175，鼠伤寒沙门菌分值27.66>15.355 ) ，配制一批平板，密封存放在4℃冰箱内，每隔一周用 3株指示菌鉴定，采用分值计算法计算质量分值，实验结果表明：在 4℃条件下密封存放 6 W，质量仍达到合格分值 (63.89>56.125)要求 ，但 鼠伤寒沙门菌的分值自第5周起，质量分值己小于合格分值(13.44<15.335 ) 。存放第 7周时 ，质量总分值已降至49.34 ，属不合格质量分值，从3株指示菌的质量分值显示 ，大肠埃希菌和鼠伤寒沙门菌的分值均未达到质量合格分值，而痢疾志贺菌的质量分值仍为合格。从菌落直径分值和生长率分值的结果表明，当指示菌的质量分值不合格时，首先出现不合格是生长率分值。实验结果表明制备好的SS培养基在 4℃冰箱内存放 6 W，对肠道致病菌的分离鉴定无不良影响。 

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