细菌生化试验——石蕊牛乳试验

原理：紫乳培养基中的主要成分为干酪素、乳糖及指示剂等。由于各种细菌对这些成分的作用不同，引起培养基的变化也有不同，观察的主要变化为：
产酸：主要从乳糖产生酸，指示剂变酸色（石蕊为红色，溴甲酚紫为黄色）。
酸凝或加有产气：产酸，并有牛乳的凝固（pH4.7以下）；如有气体形成，则凝块中有裂隙，在魏氏梭菌则呈“暴烈发酵”。

凝乳酶产生：很少或无酸产生，牛乳凝固。

胨化：部分或大部分牛奶变清亮。

产碱：细菌产生蛋白酶可将干酪素分解产生胺或氨，使培养基的pH进一步升高，呈深紫色。

培养基：加石蕊的酒精饱和溶液于新鲜脱脂牛奶中，使达浅紫色，分装于小试管，用流动蒸汽灭菌，每天1次，每次1小时，共3天。接种细菌后，培养及观察一周。

石蕊酒精溶液的制备：8g石蕊在30ml40％乙醇中研磨，吸出上清液，再如此用乙醇操作两次。加40％乙醇到总量为100ml，并煮沸1分钟。取用上清液，必要时可加几滴1N盐酸使达艳紫色。现在多应用溴甲酚紫代替石蕊，即于100ml脱脂乳中加入1.2ml的1.6％溴甲酚紫的乙醇溶液。

方法：将细菌接种于紫乳培养基中，37℃培养1～7天后观察结果，根据细菌的种类不同，可呈现上述一种或几种现象。

 

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