在食品卫生检验中，《GB4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》是一个非常重要的标准，很多种类的食品检验中，菌落总数定为必检项目。此外，该标准还用于加工环境、原材料和过程中间产品的卫生监控中。
该标准目前使用的版本为GB4789.2-2016版，新版标准于2022.06.30发布，自2022.12.30实施。本文就新旧版本的差异专门列表比较（如表1），以期为广大检验工作人员提供参考。
表1 新旧版本标准差异对比表
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比较项目 |
2016版 |
2022版 |
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设备和材料 |
恒温水浴箱:46℃±1℃ |
恒温装置：48℃±2℃ |
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培养基和试剂 |
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增加：菌落总数测试片 |
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检验程序 |
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操作步骤 |
6.1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面)，振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1∶100的样品匀液 |
6.1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面)，在振荡器上振荡混匀，制成1∶100的样品匀液。 |
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6.1.6及时将15mL~20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。 |
6.1.6及时将15mL~20mL冷却至46℃～50℃的平板计数琼脂培养基(可放置于48℃±2℃恒温 装置中保温)倾注培养皿，并转动培养皿使其混合均匀。 |
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结果与报告 |
7.2.3若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。 |
删除了“菌落蔓延”的报告形式。 |
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附录A |
A.2 磷酸盐缓冲液 |
A.2 无菌磷酸盐缓冲液 |
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附录B |
无 |
新增具体示例 |
通过上表可以看出，对于检验操作人员而言，新版标准最大的改变有三点：
1、稀释度的选择
旧版标准中规定，选“2-3个适宜稀释度的样品匀液”进行倾注；新标准中则为选“1-3个适宜稀释度的样品匀液”进行倾注。新标准这样规定，表面看来是更宽松了，可以允许检验者选择1个稀释度进行计数，但笔者认为，这一规定实际上对检验人员的要求更高了。选择计数的稀释度较多较广，比方说每个稀释度都进行计数，那么得出的每个稀释度数据之间可以相互对比一下，对检测结果有个权衡，如果只选择一个稀释度进行计数，必然要求检验人员对自己的样品非常了解，比如说有的样品中含菌量很少（少于300CFU/mL），只选最低稀释度进行计数即可，但如果含菌量较高的样品，只选一个稀释度进行计数，没有第二个稀释度数据作为参考，那么得出的检验结果很可能是有缺陷的，这种情况下，建议还是尽量多做选几个稀释度来计数。
总之，虽然新版标准允许选用1个稀释度来计数，但考虑检验工作的严谨性，我们还是建议尽量多选几个稀释度来计数，以期得出最真实的检验结果。
2、培养基的温度
旧版标准中，指定用“恒温水浴箱”，新版标准改成了“恒温装置”，这种表述更加宽泛，笔者理解为只要能达到“恒温”的目的就行，不拘泥于水浴箱或其它保温恒温装置。关键是培养基的温度，旧版为“及时将15mL～20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀”，而新版标准则改为“及时将15mL～20mL冷却至46℃～50℃的平板计数琼脂培养基（可放置于48℃±2℃恒温装置中保温）倾注培养皿，并转动培养皿使其混合均匀”，培养基的温度要求从具体的点（46℃）扩展到了一个范围（46℃～50℃），这样得出的结果除了人员操作造成的差异外，温度的差异是不是也会造成检测结果的不同呢？在实际工作中发现，对于有些菌46℃倾注计数的结果和48℃倾注计数的结果的确有差异，那么如果再提高到50℃，这种差异是否会更加明显？对于同一个样品，当不同的检验人员分别用46℃和50℃的培养基倾注计数，得出的数据不一致，甚至有争议时，该怎么办？这也是笔者比较疑惑的地方。
3、试验操作
对于试验过程中的一些操作，新版标准进行了更加细化的描述，比如6.1.3中，明确描述为稀释液需要“在振荡器上振荡混匀，制成1∶100的样品匀液”，而不再沿用旧版本中“振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1∶100的样品匀液”的说法。这一描述更加规范，也更加科学，笔者非常认同，不同方式的混匀程度，的确会给检验结果带来很大差异，具体请参考：微生物盲样检测介绍及注意事项
微生物盲样检测介绍及注意事项
http://hopebiol.com/asphtml/refere10605.htm
希望操作人员都能严格按照标准操作，进行混匀。
有关菌落总数测定的要求和其它注意事项，还可参考：
菌落总数测定的要求和注意事项
http://hopebiol.com/asphtml/refere10437.htm
除上述三个方面的变化之外，新标准还引入了“测试片”这种崭新的检验形式，后续会就此新产品做专题描述。
GB 4789.2-2016 菌落总数测定 -标准下载
http://hopebiol.com/biaozhun-download.asp?id=57
GB 4789.2-2022 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 -标准下载
http://hopebiol.com/biaozhun-download.asp?id=271
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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