你真的会倒平板吗?
称量、溶解、灭菌培养基的操作之前已经都讲过了,这次主要跟小伙伴讲讲后续的倒平板操作。
操作要点1——摇匀
灭菌后完毕后的培养基,在倒平板前务必再次摇匀。这样可有效防止琼脂在底部沉积而造成的平皿无法凝固、平皿凝胶强度不一、平皿均一性不佳等问题的发生。
操作要点2——平板厚度的确定
一般可根据培养时间的长短来确定倒平板的厚度,正常培养24-48h的培养基,一般倒15-20ml即可。
培养时间长的可以倒的厚一些,例如:支原体琼脂、Middle Brook琼脂等,一般倒平皿应超过20ml。
若平板厚度太薄,在长时间培养过后可能会出现干裂和缩边的现象。
有些需要观察溶钙环或透明环的琼脂,则不应倒的太厚,一般15ml即可,以免影响结果的观察与判断,如Baird-Parker琼脂、MC琼脂等。
操作要点3——凝固后需吹干水汽
在培养基凝固以后,表面可能会存在水汽,尤其当培养基温度较高就倾倒平皿时,表面水汽会更多。当水汽较多时,务必要再超净工作台吹干后,再进行接种操作。
未吹干就接种的平板可能会出现菌落蔓延生长、平皿颜色改变等现象,不利于观察和后续实验。
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