亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)

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操作步骤：
1、首先，将带菌滤膜，用灭菌镊子夹住其边缘部分，带菌的一面朝上，贴在培养基上。注意：滤膜往培养基上放置时，应先让其一边的外缘接触培养基，再轻轻松开镊子，让滤膜沿着先贴紧的部位逐渐与培养基接触，直至全部贴紧。这样贴的滤膜，中间不会有气泡产生。
2、将贴上滤膜的培养基平板，倒置放于厌氧培养装置内，此处我们使用是的海博生物厌氧产气包，厌氧培养袋和氧气指示剂。打开厌氧培养袋整理底部，将平板放入培养袋中，放入厌氧产气包，掰开氧气指示剂，待两分钟后表层变蓝，再将其置于厌氧培养袋中，将厌氧培养袋密封好。
3、36℃厌氧培养24h后，如果滤膜上长出黑色菌落，就初步怀疑是产气荚膜梭菌，可以挑取这种菌落进行进一步鉴定。
原理解释：
产气荚膜梭菌之所以能形成黑色菌落，是因为SPS培养基中含有亚硫酸钠和柠檬酸铁铵，产气荚膜梭菌可还原亚硫酸盐为硫化物，硫化物再与铁反应生成黑色硫化铁，从而使菌落中心呈现黑色；
而其它杂菌不会长出，是因为培养基中添加了多粘菌素B和磺胺嘧啶钠，能有效抑制除梭菌外的其它杂菌的生长。