实验操作：
1、向上用力掀开塑料瓶盖。将新鲜的羊血琼脂平板底面划分为20个~25个小格。
2、抬起铝塑环，沿着铝塑盖上的刻痕，水平方向用力拉动拉环。挑取纯培养的单个可疑菌落刺种到血平板上，每格刺种一个菌落，并刺种阳性对照菌(单增李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和斯氏李斯特氏菌)和阴性对照菌(英诺克李斯特氏菌)，穿刺时尽量接近底部，但不要触到底面，同时避免琼脂破裂。
3、36 ℃±1 ℃培养24h~48h。
结果观察：
培养结束后于明亮处观察：单增李斯特氏菌呈现狭窄、清晰、明亮的溶血圈；斯氏李斯特氏菌在刺种点周围产生弱的透明溶血圈；英诺克李斯特氏菌无溶血圈；伊氏李斯特氏菌产生宽的、轮廓清晰的β-溶血区域。

将待测菌的溶血现象与对照菌对比，再结合其他生化鉴定实验即可判断待测菌是否为单增李斯特氏菌。