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海水中发光菌的分离培养


发光菌培养基

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在夜晚的海边,有时可见到海水或漂浮的鱼虾发光现象,这是由于海水中一些发光菌大量繁殖引起的。常见的发光细菌有明亮发光杆菌、费氏弧菌、哈维氏弧菌等。今天我们一起来分离一下海水中的发光菌。
首先,在观察到海水发光现象时,可对海水进行取样,加入至2216E液体培养基中,20-25℃增菌培养基24-48h,在黑暗中观察培养基是否有发光现象。若能观察到培养基发光,说明有发光菌生长,挑取培养后的2216E液体培养基划线转接至发光菌培养基平板,20-25℃培养24-48h,在黑暗处观察是否有发光的菌落。挑取发光的单菌落转接至另一平板进行分离纯化,即得到了发光菌。也可采用发光的鱼虾尸体加入至无菌生理盐水中制成样液,直接涂布至发光菌培养基,20-25℃培养24-48h,在黑暗中观察是否有发光的菌落,再挑取发光的单菌落转接到另一平板进行分离纯化。
注:大多数发光菌的酶促反应需要氧气参与,并要在25℃以下进行,当培养温度超过30℃时会导致发光反应相关的酶活力大幅度下降,细菌则会微弱发光或不发光。

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