《GB4789.28 -2013培养基的试剂和质量要求》标准中指出，“融化后的培养基放入47℃～50℃的恒温水浴锅中冷却保温(可根据实际培养基凝固温度适当提高水浴锅温度)，直至使用，培养基达到47℃～50℃的时间与培养基的品种、体积、数量有关。融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不应超过4 h。”
  多数培养基中含有蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖等成分，蛋白胨、酵母浸粉中含有多种维生素、微量元素等营养成分，在长时间处于较高温度下保存易导致这些营养成分降解，而长时间热保温条件下的葡萄糖则易分解焦化，导致培养基pH下降。因此，长时间的保温会使培养基的营养成分流失，灵敏度下降，培养效果变差，琼脂的凝胶强度也会降低。保温过夜或更长时间这种操作方法是不规范的，应当按照标准要求，在保温4h内使用。