在培养基的配制过程中我们会发现，同样的灭菌温度和时间，同样的体积和装量的不同培养基，在灭菌后pH值变化不同，有的培养基pH值变化较多，有的培养基pH值变化较少。这是因为不同培养基的成分不尽相同，而不同的成分在灭菌过程中对培养基ph值有着不同的影响。糖类和蛋白胨是培养基中最常见的两种重要成分，那么这两种成分分别对培养基灭菌后pH值有着什么样的影响呢？
糖类，例如葡萄糖、乳糖等作为碳源被微生物所利用。糖类在高温条件下会产生有机酸使培养基pH值下降。一般情况下，培养基含糖量越高，灭菌后pH值下降越多。如果过度灭菌pH值变化会更加明显。同时，糖类在高温灭菌时容易焦化，使培养基颜色加深。
蛋白胨一般作为培养基氮源，为微生物的生长提供营养物质。蛋白胨在培养基灭菌时还能对培养基的pH值变化起到一定的缓冲作用。一般含胨量高的培养基，灭菌前后pH值变化相对较小。
另外，若培养基成分中含有缓冲剂，如磷酸氢二钾等，也可以减少培养基灭菌前后pH值的变化。