耐热大肠菌群Thermotolerant coliform bacteria

  系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5℃培养24h~48h能发酵乳糖产酸并产气。

  该菌主要来自人和温血动物粪便，可作为粪便污染指标来评价化妆品的卫生质量，推断化妆品中有否污染肠道致病菌的可能。

操作步骤 

  1.取10mL 1:10稀释的检液，加到10mL双倍乳糖胆盐(含中和剂)培养基中，置44.5℃±0.5℃培养箱中培养24h±2h，如既不产酸也不产气，继续培养至48h±2h，如仍既不产酸也不产气，则报告为耐热大肠菌群阴性。

  2.如产酸产气，划线接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36℃±1℃培养18h~24h。同时取该培养液1~2滴接种到蛋白胨水中，置44.5℃±0.5℃培养24h±2h。

  经培养后，在上述平板上观察有无典型菌落生长。耐热大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽。也有的呈紫黑色，不带或略带金属光泽；或粉紫色、中心较深的菌落，亦常为耐热大肠菌群，应注意挑选。

  3.挑取上述可疑菌落，涂片作革兰氏染色镜检。

  4.在蛋白胨水培养液中，加入靛基质试剂约0.5 mL，观察靛基质反应。阳性反应液面呈玫瑰红色；阴性反应液面呈试剂本色。

检验结果报告

  经上述检验步骤，若发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性无芽胞短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出耐热大肠菌群。