1. 培养基的配制与灭菌

  按标签说明称取海博肠道菌增菌肉汤（EE）加入到蒸馏水中，混匀，分装三角瓶，每瓶90 mL。100℃水浴加热30 min，迅速在流动的冷水中冷却，无需高压灭菌。

2. 分装

  培养基灭菌结束后，摇动均匀（注意：拿瓶口侧部，避免掌心紧握瓶口上部，以免被蒸汽烫伤），之后迅速在流动的冷水中冷却，冷却至室温后分装入试管，每管9 mL即可。（注意：分装过程中应注意无菌操作，为避免污染，必要时可采用过滤除菌进行分装）

3. 接菌

  挑取适量质控菌株（大肠埃希氏菌、阴沟肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌）对培养基进行接种，不接菌的培养基作为阴性对照。使用封口膜密封试管口。之后放置于36℃培养箱中培养18-24小时。（注意：接种过程中应注意无菌操作，接菌前后可灼烧试管口，避免污染）

4. 试验结果观察

  取试管观察，金黄色葡萄球菌在肠道菌增菌肉汤（EE）上被抑制不变色；大肠埃希氏菌、阴沟肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌浑浊，变黄。

5. 灭菌效果观察

  水浴加热灭菌与高压灭菌的培养基颜色对比。（注意：水浴加热30 min灭菌相比较于高温蒸汽灭菌，培养基颜色呈绿色，煌绿无褪色变黄的现象，高温蒸汽灭菌15 min的EE培养基有褪色变黄的现象产生）