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饲料中志贺氏菌的检测方法(二)


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一、初步生化试验

  1、挑取三糖铁琼脂上的培养物,分别在葡萄糖铵培养基和西蒙氏柠檬酸盐培养基进行划线,放置36℃±1℃培养20 h-24 h;

  2、用接种针挑取三糖铁琼脂上的培养物,在pH7.2尿素培养基上进行穿刺实验,不要插入底部,放置36℃±1℃培养24 h;

  3、挑取疑似培养物至无菌生理盐水中,充分震荡混匀制备成5麦氏浊度的均一细菌悬液(约109 CFU/mL)。用移液枪吸取100 μL菌液,分别加于赖氨酸脱酸酶肉汤、鸟氨酸脱羧酶、氰化钾生化管、水杨苷发酵管和七叶苷生化管进行接种,放置温度下进行培养,观察结果:除宋内氏菌和鲍氏13型为鸟氨酸阳性外,志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。

  4、必要时可以做革兰氏染色检查和氧化酶试验,应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。

二、进一步生化试验

  1、对于以判定为志贺氏菌属的培养物,应进一步做5%乳糖发酵,甘露醇、甘油、棉子糖和靛基质试验,操作步骤同七叶苷生化管。

  2、结果判定:志贺氏菌属4个生化群的培养物,应符合该群的生化特征。但福氏6型的生化特征与A群或C群相似。

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