瓷珠保存法和甘油保存法有什么不同?
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甘油管
又叫液体菌种保存管,是由BHI肉汤、甘油、蔗糖组成的,其中甘油成分含量较高(15%-50%),它作为一种保护剂,可以降低水的凝固点,减少冰晶形成,从而防止冰晶对细胞造成损伤,所以常用来进行菌种的保存。
进行菌种保存时,将新鲜的细菌培养物接种在保存管中,配制成大约3-4麦氏比浊度的菌悬液,来回颠倒几次使细菌乳化,之后迅速置于-20℃或-80℃冰箱保存。
复苏时,从冰箱取出后,需放在室温下解冻一段时间,并上下颠倒数次使菌液均匀后,吸取菌液至合适的细菌培养基上进行复苏。
注意:解冻后不建议再次放入冰箱用于下次使用,因为反复冻融易导致菌株死亡,在中国药典中规定,融化后的菌种保存管不可再进行冷冻保存。
瓷珠管
体内除了甘油冻存液,还有很多表面密布凹孔的小瓷珠,主要是通过瓷珠来进行细菌的吸附和保存的。
进行菌种保存时,除了要将细菌培养物接种在保存管内颠倒混匀,还需将冻存液全部吸出,仅留下瓷珠,之后迅速置于-20℃或-80℃冰箱保存。
复苏时,不需要解冻,直接用无菌接种针或镊子取出一个小瓷珠,在平板上划线或加到合适的液体培养基中复苏培养。最大优点是:操作完后立即放回冰箱,下次还可以使用。
菌种保存时间: 菌种的保存时间跟保存温度有关,一般2-8℃可保存6个月;-20℃可保存12个月;-80℃可保存24个月。
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