目的要求：

1．掌握组织培养实验室的设计

2．掌握组织培养常用的实验仪器设备及其使用方法

3．掌握调控组织培养的主要环境条件

2.1 实验室

组织培养实验室包括:

2.1.1洗涤室

洗涤室完成玻璃器皿等仪器的清洗、干燥和贮存。

2.1.2配置室

准备室完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。配备仪器设备有：

1)普通冰箱 主要用于贮存母液、各种易变质、易分解的化学药品以及植物材料等。对一些易结晶物质使用前要经加温处理。

2)分析天平

3)电蒸馏水器 。

4)磁力搅拌器　　磁力搅拌器用于加速搅拌难溶的物质，如各种化学物质、琼脂粉等 。磁力搅拌器还可加热，使之更利于溶解。

5)酸度计　

6）高压灭菌锅

7)恒温培养箱 内有温度感受器，控制箱内温度到所调指标生化培养箱还配有光照装置，用于植物材料的培养。

2.1.3接种室

接种室是完成植物材料的分离接种及培养物转移。

2.1.3接种室

接种室是完成植物材料的分离接种及培养物转移。

接种室宜小：密闭光滑，配置拉动门。

接种室要求干爽。吊装紫外线灭菌灯，最好安装一小型空调，接种室应设有缓冲间，面积2 m2为宜。

接种室的主要设备及用具有：

1) 超净台cleaning table

工作优点：操作方便自如，比较舒适，工作效率高，准备时间短。可长时间使用。

工作原理：功率在145－260W左右，它装有小型鼓风机，使空气穿过一个前置过滤器和高效过滤器，除去大于0.3μm的尘埃、细菌和真菌孢子等，最后以较洁净的气流吹到工作台面。超净空气的流速为每分钟24－30m，这已足够防止附近空气袭扰而引起的污染，这样的流速也不会妨碍采用酒精灯对器械等的灼烧消毒。

种类：水平式和垂直式二种型号。

未来机器人接种可免除超净台

2)　解剖镜 　用于分离微茎尖可采用双筒实体解剖镜。

双筒解剖镜在分离茎尖等较小组织时，便于观察、操作，通常放大５～８０倍。 放大４０倍以上操作需要有相当熟练的技术和较好的工具。

3)　无菌操作器具 按单人超净台计算：酒精灯1个；医用镊子（20－25cm ）1把；4号解剖刀1把；医用剪（15cm ）1把；酒精消毒瓶（250ml）1支；酒精棉球若干，无菌器皿1个；废物皿1个；打火机等。

2.1.4培养室culturing room

是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室大小依规模决定。

培养架规格。

培养架大多由金属制成，一般设５层，

最低一层离地高约100cm，其它每层间隔30cm左右，培养架即高1.7m左右。

培养架长度都是根据日光灯的长度而设计，如采用40W日光灯，则长1.3m左右，宽度一般为60cm。

培养条件控制

1温度， 一般保持在20-27℃左右，由空调机调节。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度，最好不同种类有不同的培养室。2室内湿度也要求恒定，相对湿度以保持在70-80%为好,可安装加湿器。

2光照安装日光灯和安装定时器，一般需要每天光照10-16h。

可白天开灯，也可晚间开灯

.2　设备和器材

2.2.1玻璃器皿

1三角瓶，

规格：有100、250、500ml等，一般使用100ml三角瓶，

优点：培养面积大， 利于组织生长，受光也比试管好。由于瓶口较小，亦不易污染。

2培养皿

规格：常用9、12cm直径，要求上、下能密切吻合。

适于：游离细胞、 原生质体、花粉等的静置培养、看护培养、无菌种子的发芽、植物材料的分离等。

3试管

规格：常用18×180 mm或20×200mm。

特点：可用于培养较高的试管苗，不易污染。

但培养量较少。

4代用广口的200ml罐头瓶，加盖半透明的塑料盖，特点：成本较低，操作方便，也减少了培养材料的损伤。

但缺点是易引起污染。

5代用塑料器皿。

特点：具有质轻、透明、不易破碎、成本低等优点，如培养容器多为平底方盒形，可提高培养空间利用率。必须是采用聚丙烯材料制成，能耐高温。缺点透明度不好，不耐过火灼烧。

6瓶口封塞

要求：要具有一定的通气性和密闭性，以防止培养基干燥和杂菌污染。

1） 以前用棉塞。但这种封口办法夏季极易污染，且不易保持培养基湿度。

2） 用聚丙烯塑料薄膜，以线绳结扎或橡皮圈箍扎。

为了增加通气性，可在里面衬一层硫酸纸或牛皮纸。这样经济方便， 且通气好。

3） 也可采用专用的封口膜。

7其它器皿

用处：配制培养基，贮藏母液，材料的消毒等需要各种化学实验用的玻璃器皿，

种类：包括100、250、500、1000ml烧杯；10、100、1000ml量筒； 100、1000ml试剂瓶（棕色）等等。