液体硫乙醇酸盐培养基原理和使用方法

张辉

2019-3-13 10:41:21 青岛海博生物

一、试验原理：

液体硫乙醇酸盐培养基用于药品、生物制品的无菌检测，也可用于好氧菌和厌氧菌的检测。

酪胨在培养基中作为基础营养物质；酵母粉提供B族维生素；L-胱氨酸和硫乙醇酸钠均能使体系处于低氧化还原电势，有利于消除菌体生长代谢过程中产生的对自身有害的过氧化物质，此外L-胱氨酸的巯基（-SH）可以中和重金属的毒性，因此可以用于带有重金属物质的无菌检验；氯化钠维持菌体细胞生长所需的渗透压；刃天青作为氧化还原指示剂，该指示剂氧化态为粉红色，还原态为无色；琼脂可阻止二氧化碳、氧气扩散进入，从而造成厌氧环境。

二、培养基配方（g/L）：

酪胨(胰酶水解)	15.0
酵母浸出粉	5.0
葡萄糖	5.0
硫乙醇酸钠	0.5
L-胱氨酸	0.5
氯化钠	2.5
刃天青	0.001
琼脂	0.75
pH值7.1±0.2（25℃）

三、试验方法：

称取本品29.25g，加热搅拌溶解于1000mL纯化水中，分装适宜容器，其装量与容器高度的比例应符合，培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。121℃高压灭菌15分钟迅速冷却。在供试品接种前，培养基氧化层高度不得超过培养基深度的1/5。否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不得超过20分钟），迅速冷却，只限加热一次，并应防止被污染。

四、试验结果判断：

接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养24-72小时。

质控菌株	菌株编号	接种量（CFU）	生长情况	其他特征
金黄色葡萄球菌	CMCC(B) 26003	10-100	+++	在试管中呈颗粒生长
铜绿假单胞菌	CMCC(B) 10104	10-100	+++	在试管表层生长，浑浊
枯草芽孢杆菌	CMCC(B) 63501	10-100	+++	在试管表层生长，浑浊
生孢梭菌	CMCC(B) 64941	10-100	+++	浑浊
产气荚膜梭菌	ATCC 13124	10-100	+++	在试管氧化层以下呈条状生长