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L-山梨糖酵母膏培养基

用于条纹假单胞菌(Pseudomonas striata)N1197A及氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)N1197A菌的生长以生产2-酮基-L-古龙酸(维生素C前体)。

利用细胞培养工程手段提高基因表达水平

当一个重组菌构建完成后，重组菌的生理代谢和培养条件就成为影响目的基因表达效率的重要因素。

重组细胞培养基设计和培养条件优化

一般而言，基因重组微生物培养基设计与普通微生物并无本质差别

目的基因的高效分泌型表达

大肠杆菌是最常用的宿主细胞，但大肠杆菌没有能力将所表达的蛋白质产物分泌到胞外，一般在胞内形成包含体。

质粒设计对目的基因表达的影响

影响外源DNA转录的主要因素是启动子的强弱。

目的基因的高效表达

通过基因操作及筛选获得重组子后，最重要的问题就是目的基因的表达效率。

通过酶活性筛选

如果目的基因编码的是一种酶，而这种酶又是宿主细胞所不能编码的，

通过免疫反应筛选

以目的基因在宿主细胞中的表达产物（蛋白质或多肽）作抗原，以该基因表达产物的免疫血清作抗体，

核酸杂交法筛选

利用碱基配对的原理进行分子杂交是核酸分析的重要手段，也是鉴定基因重组体的常用方法。

营养缺陷互补法筛选

若宿主细胞属于某一营养缺陷型，则在培养这种细胞时的培养基中必须加入该营养物质后，细胞才能生长。

重组体的筛选

目的基因和载体重组并进入宿主细胞后，由于操作失误及不可预测因素的干扰等，并不能全部按照预先设计的方式重组和表达，

粒子轰击法

金属微粒在外力作用下达到一定速度后，可以进入植物细胞，但又不引起细胞致命伤害，仍能维持正常的生命活动

多聚物介导法

聚乙二醇（PEG）和多聚赖氨酸等是协助DNA转移的常用多聚物，尤以PEG应用最广。

高压电穿孔法

外源DNA分子还可以通过电穿孔法转人受体细胞。

利用显微操作系统和显微注射技术将外源基因直接注注人实验动物的受精卵原核，使外源基因整合到动物基因组

转导的定义

所谓转导是指通过噬菌体（病毒）颗粒感染宿主细胞的途径将外源DNA分子转移到受体细胞内的过程。

对于原核细胞，常采用转化将目的基因导入受体细胞。原核细胞的转化过程就是一个携带基因的外源DNA分子通过与膜结合进入受体细胞、并在胞内复制和表达的过程。

微生物培养基抑菌剂之抗生素

抗生素在微生物培养基中多作为抑菌剂使用,通常分为β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、林可酰胺类、多肽类、喹诺酮类、磺胺类、利福霉素类等。

目的基因导入宿主细胞

目的基因与载体在体外连接重组后形成重组DNA分子，必需导入到适当的宿主细胞进行繁殖，才能使目的基因得到大量扩增或表达。

许多反应中正磷酸既不是底物，也不是反应产物，但是催化该反应的酶仍有可能受到磷酸盐的阻遏。

磷酸转移酶参与氨基糖苷的形成。在抗生素的生物合成途径中，首先合成的是磷酸化的无活性中间产物

磷酸盐控制

在细菌、霉菌和植物中次级代谢产物的生物合成常常受到磷酸盐的控制。

抗生素生产受到高浓度氨离子的抑制是一个普遍存在的现象。

葡萄糖是微生物生长的优质碳源，但在抗生素生产中却会抑制产物的合成。

营养物浓度的调节

对于绝大多数抗生素生产菌而言，若在营养丰富的培养基中培养，只有当生长完全停止时才会开始积累次级代谢产物，发酵过程可以区分为生长阶段和抗生素生产阶段。

抗生素生物合成的反馈调节已经从两个方面得到证明。直

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