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酵母菌的碳源同化试验-YNB培养基
纪旭艳
2025/5/21 15:46:45 青岛海博生物

一、实验简介

  碳源同化试验和糖类发酵试验是鉴定酵母菌类常用的方法,在碳源充足的条件下,酵母菌会将糖类氧化分解为二氧化碳和水(部分酵母会在无氧环境下特定糖类分解为酒精和二氧化碳)提供能量快速生长,即为糖发酵。而在碳源不足的情况下,一些酵母菌则可以利用糖类合成自身所需的其他营养物质,即为碳源同化。一般来说,真菌能够发酵的糖类物质,也能够同化利用,但是能同化利用的,却不一定能发酵。通过使用碳源短缺的YNB培养基加入相应的糖,然后接种酵母菌进行培养,可通过酵母菌是否能生长判断该酵母菌是否能够同化利用某种糖。


二、YNB成分(g/L)

  略


三、实验方法

  培养基的配制:称取YNB培养基6.7g,另取5g糖,加入至100mL无菌水中,制成10倍浓度的溶液,用0.22μm滤膜过滤除菌,取0.5mL的10倍浓度溶液,加入至装有4.5mL的无菌水试管中,振荡均匀后使用。

  接种及培养:挑取平板上的纯菌落加入至无菌生理盐水中振荡均匀,制成约106-107CFU/mL的菌悬液,吸取50-100μL的菌悬液接种至试管中,25℃培养3-7天,记录生长情况。

  注:不同的酵母对不同的糖类同化能力存在差异,有时需持续观察1-4周,能在1周或两周内出现明显浑浊生长,为强同化;在两周内无明显生长,超过两周后迅速生长浑浊,为延滞同化;两周后缓慢变浑浊,为缓慢同化;浑浊程度较低为弱同化;不浑浊为不同化。


四、生长现象及结果观察

  接种白色念珠菌至YNB培养基中,25℃需氧培养3-5d。

测试菌株

菌株编号

碳源

生长现象

白色念珠菌

CMCC98001

葡萄糖

阳性,浑浊

白色念珠菌

CMCC98001

乳糖

阴性,不生长

白色念珠菌

CMCC98001

半乳糖

阳性,浑浊

白色念珠菌

CMCC98001

木糖

阳性,浑浊


图1 白色念珠菌碳源同化试验(从左至右分别为葡萄糖、乳糖、半乳糖、木糖)


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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