用途:用于细菌DNA酶检测。
成分(g/L)
胰蛋白胨
15.0
大豆胨
5.0
氯化钙
0.02
氯化钠
5.0
DNA
2.0
琼脂
15.0
pH值7.3±0.2
25℃
检验原理:
胰蛋白胨和大豆胨提供碳源和氮源;有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA),使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链;氯化钙提供阳离子作为激活剂;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。将盐酸滴在培养基表面,如DNA酶阳性,其菌落周围可以产生明显透明环,如DNA酶阴性,盐酸与完整的脱氧核糖核酸反应,可形成浑浊的沉淀;如果加入0.1%甲苯胺蓝溶液,甲苯胺蓝为指示剂,DNA酶阳性时,水解DNA部分为蔷薇色;DNA酶阴性时,甲苯胺蓝显蓝色。
用法:
称取本品42.0g,缓缓加热溶解于1000ml蒸馏水中(避免形成不溶性丝状物),116℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,倾入无菌平皿。将平板培养基分成4-8区,每区用接种环划线肉汤培养物,37℃培养18-24小时,在培养基表面滴加 1mol/L盐酸,若为DNA酶阳性,在生长菌落周围产生明显透明环。如果加入0.1%甲苯胺蓝溶液,残留DNA部分变蓝,其水解部分变为蔷薇色。
注:培养基含少量氯化钙,灭菌后可能出现微量沉淀。
DNA酶琼脂上细菌菌落特征:
DNA酶琼脂 金黄色葡萄球菌ATCC25923 |
DNA酶琼脂 金黄色葡萄球菌ATCC6538 |
DNA酶琼脂微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置37±1℃需氧培养18-24小时。
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