配方详情

李斯特氏菌显色培养基
Listera Chromogenic Medium


用途:用于李斯特氏菌的显色培养,单增李斯特氏菌显蓝色,外围有一不透明环

应用范围:李斯特氏菌显色培养基是青岛高科园海博生物技术有限公司研制,可快速检测食品和药品中单增李斯特氏菌。阴性结果可在3天内检测完成。单增李斯特氏菌显蓝色,菌落周围有一不透明环。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化钠维持渗透压,琼脂是凝固剂,氯化锂抑制革兰氏阴性菌生长,抑菌剂抑制除李氏菌外的革兰氏阳性菌生长。

配方(g/L):
 营养物质

  70.0 

 显色剂

  6.0 

 pH 7.2±0.2  25℃

  李斯特氏菌添加剂6.0g、李斯特氏菌抑菌剂(冻干粉)1ml*5支 (已配套,无需另购)
  此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。   

用法:
  称取基础培养基 14.2g 加入 180ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加剂,加入 20ml 无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动 1-2min,使其混合均匀,将二者分别于 121℃ 高压灭菌 15 min。冷至 50℃ 左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入复溶后的李斯特氏菌抑菌剂1 支,混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 2-3mm,这样有利观察不透明环。
操作步骤:
  使用前,把制备好的培养基放置室温 10-20 分钟。
  1、按SN标准、GB标准、FDA标准、ISO标准或其它标准制备样品液;
  2、把样品液加入李氏增菌肉汤(LB1、LB2)中增菌;或把样品液和Half-Fraser增菌液按照 1:10 的比例混匀,30℃ 培养 24 小时;或其它增菌液中增菌培养;
  3、取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上,36℃±1℃ 培养 24-48 小时。
质量控制:
  1、外观
  此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈不透明乳白色培养基。
  2、微生物试验

 质控菌株

 ATCC

 生长情况

 菌落颜色

不透明环

单增李斯特氏菌

19114

+++

蓝色

+

 绵羊李斯特氏菌

 CICC21663

+++

 蓝色

+

 斯氏李斯特氏菌

CICC21671

+++

 蓝色

-

 金黄色葡萄球菌

 25923

-

 -

-

大肠埃希氏菌

 25922

 -

 -

-

鼠伤寒沙门氏菌

 14028

 -

 -

-

黑曲霉

 16404

 -

 -

-

   
典型特征:
   单增李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 24-28 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 48 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。斯氏李斯特氏菌 36℃±1℃ 培养 24-48 小时,平板上出现蓝色菌落,菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。

贮存:
  制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃。
失效:
  干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

注意:
  此培养基仅供实验室使用。
参考文献:
  1、VAN NETTEN, P., PERALES, J., VAN DE MOOSDIJK, A., CURTIS, G.D.W., a. MOSSEL, D.A.A.: Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes.  Int. Food Microbiol., 8; 299-316 (1989).
  2、HAMMER, G., HAHN, G., KIRCHHOFF, H., a. HEESCHEN, W.: Vergleich der Eignung von Oxford- und PALCAM-Medium zur Isolierung von Listeria monocytogenes aus Weichkse.  Dtsch. Milchwirtschaft, 41; 334-336 (1990).
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http://www.hopebiol.com/asphtml/product536.htm


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