应用范围:细菌总数显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于快速检测食品、水质和环境中的细菌总数。菌落显红色、淡红色。
配方 (g/L):
特殊营养物质 |
8.4 |
显色剂 |
0.1 |
琼脂 |
15.0 |
pH 6.9-7.1 25 ℃ |
用法:
称取本品 23.5 克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却至45-50℃待用;
倾注法:
取适当稀释度的样品液1ml加入无菌平皿中,再加入冷却好的培养基约15ml,混合均匀,待培养基完全凝固后,36±1℃培养24~48h进行计数;
涂布法:
取冷却至45-50℃培养基,倾入无菌平皿,待培养基完全凝固后,在36±1℃的培养箱中倒置放置1-2小时,加入适当稀释度的样品液1ml,涂布于培养基上,36±1℃培养24~48h进行计数。
贮存:
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效:
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤:
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液1ml加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36±1℃培养24~48h,选用有30~200个菌落的平板,计数平板上出现的红色菌落(不论其大小和颜色深浅均计数)。
质量控制:
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2、微生物试验
在36±1℃培养24-48h:
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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单增李斯特氏菌
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19114
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+++
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红色
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金黄色葡萄球菌
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25923
|
+++
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红色
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大肠埃希氏菌
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25922
|
+++
|
红色
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沙门氏菌
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14028
|
+++
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红色
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肺炎克雷伯氏菌
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10031
|
+++
|
红色
|
方法的局限性:
本培养基用于菌落总数计数时,有些菌落可能会显无色,但都应计数在总数内
典型特征:
典型菌落为红色至淡红色。
参考文献:
• FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of ?-glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. – J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
• KILIAN, M. a. BüLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. – Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la ?–galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bactériologique, en particulier des Enterobacteriaceae. – Ann. Inst. Pasteur ( Paris ), 102; 267-277 (1962).
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