已灭菌培养基的保存方法

李令梅

2025/3/19 16:56:07 青岛海博生物

已灭菌培养基的保存需兼顾无菌状态维持和成分稳定性，具体方法如下：

一、保存温度与时限

1、冷藏保存
灭菌后的培养基应存放于2-8℃冰箱中，避免反复冻融导致成分析出或降解。
对于部分培养基（如含特定热敏感成分），允许在4-10℃范围内保存，但需确保温度波动不超过±3℃。
保存期限：未开封灭菌培养基通常可保存1个月；若分装于密闭容器中且储存条件稳定，部分培养基可延长至1年。
2、特殊类型培养基的保存
液体培养基：若未开封且严格密封，可短期（数周）常温保存，但需尽快使用以减少污染风险。
琼脂平板：凝固后需立即冷藏（5℃±3℃），并装入密封袋防止冷凝水产生。

二、包装与标记要求

1、密封保存
培养基需储存在无菌密封容器或密封袋中，避免杂菌侵入和水分蒸发。
灭菌后的培养基应立即从灭菌器中取出，不可长期滞留。
2、标记规范
在容器或平皿底部标明培养基名称、灭菌日期、有效期，或使用编码系统简化标记。

三、注意事项

1、避光防潮
所有培养基需避光保存，防止光照加速成分分解；冷藏时需远离冰箱冷凝水区域14。
2、使用前处理
冷藏保存的培养基使用前需平衡至室温，避免直接高温加热导致局部过热。
已融化的琼脂培养基应在 4小时内使用，不可重新凝固后再次使用。
3、质量控制
定期检查培养基外观（如是否脱水、变色或污染），过期或异常培养基需废弃。

四、不同培养基的特殊要求

‌培养基类型‌	‌保存要点‌
‌含糖/蛋白质培养基‌	严格控制灭菌时间，避免高温碳化；冷藏保存不超过2周‌。
‌碳酸氢钠缓冲体系‌	需过滤灭菌，避免高压导致pH值变化；保存时需隔绝CO₂‌。
‌琼脂平板‌	灌装量建议25-30 mL/皿，防止脱水；表面接种前需适度干燥（25-50℃烘箱）‌。

五、保存方法对比

‌方法‌	‌适用场景‌	‌优势‌	‌限制‌
2-8℃冷藏	大多数培养基长期保存	稳定性高、适用范围广	需定期检查冰箱温度
‌常温密封‌	未开封液体培养基短期保存	操作简便、节省能耗	仅限密封良好且成分稳定
‌-20℃冷冻‌	特殊成分培养基（如抗生素）	延长保存期至数月	解冻后需一次性使用